rProtein A Seplife Suno是藍(lán)曉科技應(yīng)對(duì)抗體客戶(hù)需求推出的Protein A親和層析填料，以球形，高交聯(lián)瓊脂糖凝膠為基質(zhì)，通過(guò)自主創(chuàng)新技術(shù)將耐堿性重組蛋白A鍵合到該基質(zhì)上。可以特異性地與抗體的Fc區(qū)結(jié)合，用于抗體（單抗和多抗）的分離純化，只需一步親和層析，即可從腹水、血清或培養(yǎng)液等樣品中得到高純度的抗體。
產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)
產(chǎn)品名稱(chēng) | rProtein A Seplife Suno |
外觀 | 球狀凝膠，無(wú)臭無(wú)味 |
基質(zhì) | 高交聯(lián)瓊脂糖微球 |
配基 | 耐堿重組Protein A |
流速（cm/h） | ＞250cm/h（0.1MPa） |
耐壓（MPa） | 0.3MPa |
粒徑（μm） | 65μm |
載量 | 70mg/ml |
配基密度 | 8~9mg/ml |
耐堿性 | 0.1-0.5M NaOH |
載量和駐留時(shí)間關(guān)系
壓力流速曲線
備注：層析柱規(guī)格：16mm×400mm
耐堿測(cè)試
層析柱測(cè)試完DBC(10%流穿)后，用0.5M NaOH洗脫15min，室溫下放置24h，然后測(cè)試DBC變化。
填料名稱(chēng) | 泡堿前DBC(mg/ml) | 泡堿后DBC(mg/ml) | 下降百分比% |
國(guó)外品牌 | 60.3 | 46.7 | 22.6 |
rProtein A Seplife Suni | 71.5 | 56.4 | 21.0 |
抗體純化應(yīng)用
某抗體發(fā)酵液純化過(guò)程，從載量，純度，收率，洗脫體積等方面平行對(duì)比國(guó)外品牌LX，結(jié)果表明各方面數(shù)據(jù)與參比填料接近。
實(shí)驗(yàn)條件：
儀器 | AKTA Pure 150 |
層析柱 | r-ProteinA Seplife Suni(Hitrap 1ml預(yù)裝柱) |
預(yù)平衡 | 20mM PB+150mM NaCl，pH7.4 |
淋洗 | 20mM PB+150mM NaCl，pH7.4 |
洗脫 | 100mM檸檬酸鈉，pH3.0 |
CIP | 0.5M NaOH |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
填料名稱(chēng) | 載量(mg/ml) | SEC純度(%) | 收率(%) |
國(guó)外品牌LX | 53.5 | 97.2 | 99.4 |
rProtein A Seplife Suni | 54.6 | 96.9 | 99.2 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作，必須保證每種材料都處于工作溫度。r-ProteinA Seplife Suno填料可使用常規(guī)瓊脂糖層析介質(zhì)裝柱方法。
3.2平衡
用3-5CV預(yù)平衡液平衡層析柱，直至pH和電導(dǎo)率保持不變。
3.3上樣
樣品的預(yù)處理：樣品離心后，用0.45μm濾膜過(guò)濾，然后上樣，以免堵塞層析柱。上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇，一般可通過(guò)測(cè)試該樣品在層析柱上的DBC作為參考。
3.4洗脫
一般利用低pH緩沖液進(jìn)行洗脫，選擇pH3.0-3.5的緩沖液：如0.1mol/L甘氨酸-HCl，pH3.0，實(shí)際洗脫條件可優(yōu)化。洗脫后，應(yīng)立刻中和緩沖液，將收集到的抗體溶液中和至中性（pH7.4左右），以維持抗體的生物活性，一般中和液為1mol/L Tris-HCl，pH9-10。
3.5清洗
CIP方法：
r-ProteinA Seplife Suno是一種耐堿親和介質(zhì)，可以耐受 0.1M-0.5M NaOH溶液的清洗，一般使用大于3CV的 0.1-0.5 M NaOH，接觸時(shí)間為15 min；然后用5CV的平衡液沖洗至中性。
注：由于發(fā)酵液純化過(guò)程會(huì)引入部分雜質(zhì)吸附在層析柱上，造成壓力升高，在做CIP時(shí)，可考慮一定次數(shù)后進(jìn)行up flow。
3.6存儲(chǔ)
密封保存在4~8℃（保存溶液為20%乙醇）干燥、通風(fēng)、清潔處，不可冷凍；用過(guò)的柱子保存在4~8℃，20%乙醇溶液中。
3.7運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
4.注意事項(xiàng)
（1）該介質(zhì)從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下恢復(fù)到室溫，然后緩慢搖勻后裝柱，以免產(chǎn)生氣泡影響柱效；
（2）一般Protein A親和層析填料裝柱高度15-25cm，根據(jù)實(shí)際情況做合理的高度選擇；
（3）發(fā)酵液上樣前做好澄清過(guò)濾操作，以防堵塞層析柱；
（4）凝膠用低pH緩沖液洗脫的時(shí)間應(yīng)盡可能短，洗脫后用中性緩沖液盡快洗到pH中性，以延長(zhǎng)介質(zhì)的使用壽命。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
rProtein A Seplife Suno | A4093101 | 5ml |
A4093102 | 25ml | |
A4093103 | 100ml | |
A4093104 | 500ml | |
A4093105 | 1L | |
A4093106 | 5L | |
A4093107 | 10L |
生產(chǎn)日期：見(jiàn)標(biāo)簽
使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱(chēng)/生產(chǎn)企業(yè)：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址：西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
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注冊(cè)人名稱(chēng)/銷(xiāo)售企業(yè)：蘇州藍(lán)曉生物科技有限公司
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