Seplife? Oligo dT(20)是一種親和層析填料，專門用于從復(fù)雜體系中捕獲信使 RNA (mRNA)，從而提高其純度。高度交聯(lián)的苯乙烯/二乙烯基苯 (DVB)基質(zhì)提供剛性多孔基質(zhì)，在其上進(jìn)行親水改造，用(dT)基團(tuán)進(jìn)行功能化。
親水改造的作用是最大限度地減少非特異性相互作用，而功能基團(tuán)poly(DT)則通過堿基配對(duì)與mRNA的polyA尾特異性相互作用。
Seplife? Oligo dT(20) 具有以下特性：
◆粒度分布均勻，為50微米。
◆高載量
◆高耐鹽、耐壓性能
◆pH范圍穩(wěn)定性
◆在各種溫度范圍內(nèi)保持穩(wěn)定
◆在標(biāo)準(zhǔn)純化條件下有效捕獲和釋放mRNA
Seplife?Oligo dT（20）是一種平均粒徑為50微米的親和色譜樹脂，專為從復(fù)雜混合物中高效捕獲mRNA而設(shè)計(jì)。
技術(shù)指標(biāo)
| 產(chǎn)品名稱 | Seplife? Oligo dT （20） |
| 外觀 | 白色球狀 |
| 種類 | 含有dT（20）官能團(tuán)的親和層析 |
| 基質(zhì) | 聚苯乙烯-二乙烯 |
| 配基密度(umol dT/mL ) | 0.25-0.35 |
平均粒徑（μm） | 50 |
| pH穩(wěn)定性 | 2~13 |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在5M NaCl溶液中穩(wěn)定，室溫下在20%和70%乙醇、20%乙腈和30%異丙醇水溶液中穩(wěn)定。建議使用0.1M氫氧化鈉進(jìn)行原位清洗 |
流速（cm/h） | ＞400cm/h，0.3Mpa（0.1M NaCl） |
建議工作溫度（℃） | 2-65 |
| 儲(chǔ)存溶液 | 20%乙醇溶液 |
使用方法
3.1裝柱方法
應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行柱填充。確保每種材料都處于其工作溫度非常重要。
Seplife? Oligo dT(20)填料以裝在20%乙醇溶液中提供。為了確定填充指定層析柱所需的填料體積，必須確定或考慮漿液濃度和壓縮系數(shù)。Seplife? Oligo dT(20) 填料的壓縮系數(shù)為 1.12 ；壓縮系數(shù)由重力沉降體積與填料床體積之比確定。
可采用兩種裝柱程序：恒壓裝柱和恒流裝柱。
3.2平衡
使用約5CV的適當(dāng)緩沖液平衡柱。確保流出液的電導(dǎo)率和 pH 值與平衡緩沖液完全相同。平衡溶液可以是中性pH緩沖液，例如Tris或磷酸鹽緩沖液，例如10mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM EDTA (pH 7.4) 。高電導(dǎo)率可促進(jìn)填料上的poly DT與mRNA分子的poly A 之間的親和相互作用，因此通常使用至少0.2 -0.5M的NaCl 濃度。平衡緩沖液應(yīng)具有合適的電導(dǎo)率以促進(jìn) mRNA 結(jié)合。
3.3樣品制備
mRNA樣品應(yīng)在與平衡緩沖液相似的緩沖液中制備，且緩沖液的電導(dǎo)率要適宜。如果RNA 樣品需要變性，則將樣品在65-70 oC下加熱10-15分鐘，然后立即放入冰浴中。這種處理有助于破壞二級(jí)結(jié)構(gòu)，并可能提高純化性能。
mRNA的大小和結(jié)構(gòu)可能有很大差異，這會(huì)影響其與 Seplife? Oligo dT(20)的結(jié)合能力。樣品溶解度、濃度、雜質(zhì)分布以及緩沖液成分會(huì)影響與 Seplife? Oligo dT(20) 的結(jié)合能力，因此應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化。通常，樣品應(yīng)用的保留時(shí)間至少為3分鐘。
確保樣品經(jīng)過過濾（0.22μm 或 0.45μm 過濾器），并且如果可能的話，在加入層析柱之前進(jìn)行脫氣。
完成上樣后，用平衡緩沖液（2-3CV）和優(yōu)化的低電導(dǎo)率緩沖液沖洗層析柱，以改善雜質(zhì)去除。例如，可以應(yīng)用10mM Tris-HCl、0. 2 M NaCl、1mM EDTA（pH 7.4）溶液 3-5CV，以促進(jìn)在樣品洗脫前去除雜質(zhì)。
3.4洗脫
在電導(dǎo)率降低時(shí)，polyA和polyT之間會(huì)發(fā)生靜電排斥，導(dǎo)致兩者分離。從Seplife? Oligo dT(20)層析填料洗脫mRNA時(shí)遵循此原理。降低緩沖液中的鹽濃度甚至使用水都會(huì)導(dǎo)致 mRNA 洗脫。例如，10mM Tris-HCl、1mM EDTA（pH 7.4）3-5CV溶液或使用3-5CV水進(jìn)行樣品洗脫。應(yīng)優(yōu)化洗脫條件，以確保應(yīng)用最佳條件以實(shí)現(xiàn)高純度和 mRNA 回收率。
可以通過加熱洗脫緩沖液或?qū)⑾疵撝訜嶂?5 o C來增強(qiáng)洗脫。
3.5再生
Seplife? Oligo dT(20)色譜填料應(yīng)根據(jù)污染嚴(yán)重程度用3-5CV水或20% - 30%乙醇溶液沖洗。再生過程后應(yīng)進(jìn)行 CIP 和用平衡緩沖液清洗柱或在儲(chǔ)存溶液中平衡。
3.6在位清洗（CIP）
Seplife? Oligo dT(20)色譜填料可用 3-5CV 的 0.1M NaOH 溶液消毒。如果需要更嚴(yán)格的 CIP，則可以使用0.5M NaOH溶液（3-5CV）。
CIP 后，用平衡緩沖液沖洗柱3-5CV。
4.儲(chǔ)存
不立即使用的層析填料應(yīng)儲(chǔ)存在2-8 °C的20%乙醇中。已裝填的填料應(yīng)儲(chǔ)存在 2-8 °C 的 20% 乙醇中。請(qǐng)勿冷凍。
使用前，讓散裝介質(zhì)和填充柱達(dá)到室溫。
5. 運(yùn)輸
運(yùn)輸過程中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品一起運(yùn)輸。
6. 注意事項(xiàng)
6.1層析柱選擇：理論上只要柱子足夠長(zhǎng)，就能得到理想的分離度，但由于柱子的流速與壓力梯度有關(guān)，柱長(zhǎng)的增加會(huì)使流速變慢，峰形變寬，分離度降低；而隨著柱徑的增加，液流的不均勻性增大，分離度明顯下降。
6.2柱裝填：裝填后的柱床表面必須平整，無(wú)溝流、氣泡，否則應(yīng)重新裝填。
6.3在純化過程中，必須嚴(yán)格控制洗脫緩沖液的pH值和電導(dǎo)率。在柱層析之前，必須用平衡緩沖液徹底平衡樣品和層析介質(zhì)。
6.4洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速，不宜過快。
6.5在上樣和整個(gè)洗脫過程中，防止柱表面干燥。
訂購(gòu)信息
| 產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
| Seplife? Oligo dT（20） | PS11225X(50)1-1 | 25ml |
| PS11225X(50)1-2 | 100ml | |
| PS11225X(50)1-3 | 500ml | |
| PS11225X(50)1-4 | 1L | |
| PS11225X(50)1-5 | 5L | |
| PS11225X(50)1-6 | 10L |
生產(chǎn)日期：見標(biāo)簽
使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè)：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址：西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
郵政編碼：710076
聯(lián)系電話：86-29-8110 4050
傳真：029-8669 1600-8254
官方網(wǎng)站：www.sunresin.com
注冊(cè)人名稱/銷售企業(yè)：蘇州藍(lán)曉生物科技有限公司
注冊(cè)人地址/銷售地址：蘇州市區(qū)工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)5樓525室
聯(lián)系電話：0512-65160522
蘇州市工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)
0512-65160522
seplife@sunresin.com
 |  |
| 官網(wǎng)二維碼 | 微信公眾號(hào) |
