rProtein A Seplife Suno是藍曉科技應對抗體客戶需求推出的Protein A親和層析填料，以球形，高交聯(lián)瓊脂糖凝膠為基質，通過自主創(chuàng)新技術將耐堿性重組蛋白A鍵合到該基質上?？梢蕴禺愋缘嘏c抗體的Fc區(qū)結合，用于抗體（單抗和多抗）的分離純化，只需一步親和層析，即可從腹水、血清或培養(yǎng)液等樣品中得到高純度的抗體。
產品技術參數(shù)
產品名稱 | rProtein A Seplife Suno |
外觀 | 球狀凝膠，無臭無味 |
基質 | 高交聯(lián)瓊脂糖微球 |
配基 | 耐堿重組Protein A |
流速（cm/h） | ＞250cm/h（0.1MPa） |
耐壓（MPa） | 0.3MPa |
粒徑（μm） | 65μm |
載量 | 70mg/ml |
配基密度 | 8~9mg/ml |
耐堿性 | 0.1-0.5M NaOH |
載量和駐留時間關系
壓力流速曲線
備注：層析柱規(guī)格：16mm×400mm
耐堿測試
層析柱測試完DBC(10%流穿)后，用0.5M NaOH洗脫15min，室溫下放置24h，然后測試DBC變化。
填料名稱 | 泡堿前DBC(mg/ml) | 泡堿后DBC(mg/ml) | 下降百分比% |
國外品牌 | 60.3 | 46.7 | 22.6 |
rProtein A Seplife Suni | 71.5 | 56.4 | 21.0 |
抗體純化應用
某抗體發(fā)酵液純化過程，從載量，純度，收率，洗脫體積等方面平行對比國外品牌LX，結果表明各方面數(shù)據(jù)與參比填料接近。
實驗條件：
儀器 | AKTA Pure 150 |
層析柱 | r-ProteinA Seplife Suni(Hitrap 1ml預裝柱) |
預平衡 | 20mM PB+150mM NaCl，pH7.4 |
淋洗 | 20mM PB+150mM NaCl，pH7.4 |
洗脫 | 100mM檸檬酸鈉，pH3.0 |
CIP | 0.5M NaOH |
實驗結果：
填料名稱 | 載量(mg/ml) | SEC純度(%) | 收率(%) |
國外品牌LX | 53.5 | 97.2 | 99.4 |
rProtein A Seplife Suni | 54.6 | 96.9 | 99.2 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標準操作規(guī)程操作，必須保證每種材料都處于工作溫度。r-ProteinA Seplife Suno填料可使用常規(guī)瓊脂糖層析介質裝柱方法。
3.2平衡
用3-5CV預平衡液平衡層析柱，直至pH和電導率保持不變。
3.3上樣
樣品的預處理：樣品離心后，用0.45μm濾膜過濾，然后上樣，以免堵塞層析柱。上樣量根據(jù)樣品的性質和層析介質的量進行選擇，一般可通過測試該樣品在層析柱上的DBC作為參考。
3.4洗脫
一般利用低pH緩沖液進行洗脫，選擇pH3.0-3.5的緩沖液：如0.1mol/L甘氨酸-HCl，pH3.0，實際洗脫條件可優(yōu)化。洗脫后，應立刻中和緩沖液，將收集到的抗體溶液中和至中性（pH7.4左右），以維持抗體的生物活性，一般中和液為1mol/L Tris-HCl，pH9-10。
3.5清洗
CIP方法：
r-ProteinA Seplife Suno是一種耐堿親和介質，可以耐受 0.1M-0.5M NaOH溶液的清洗，一般使用大于3CV的 0.1-0.5 M NaOH，接觸時間為15 min；然后用5CV的平衡液沖洗至中性。
注：由于發(fā)酵液純化過程會引入部分雜質吸附在層析柱上，造成壓力升高，在做CIP時，可考慮一定次數(shù)后進行up flow。
3.6存儲
密封保存在4~8℃（保存溶液為20%乙醇）干燥、通風、清潔處，不可冷凍；用過的柱子保存在4~8℃，20%乙醇溶液中。
3.7運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。
4.注意事項
（1）該介質從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下恢復到室溫，然后緩慢搖勻后裝柱，以免產生氣泡影響柱效；
（2）一般Protein A親和層析填料裝柱高度15-25cm，根據(jù)實際情況做合理的高度選擇；
（3）發(fā)酵液上樣前做好澄清過濾操作，以防堵塞層析柱；
（4）凝膠用低pH緩沖液洗脫的時間應盡可能短，洗脫后用中性緩沖液盡快洗到pH中性，以延長介質的使用壽命。
產品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
rProtein A Seplife Suno | A4093101 | 5ml |
A4093102 | 25ml | |
A4093103 | 100ml | |
A4093104 | 500ml | |
A4093105 | 1L | |
A4093106 | 5L | |
A4093107 | 10L |
生產日期：見標簽
使用期限：在適當?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產企業(yè)：西安藍曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產地址：西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍曉科技園
售后服務單位：西安藍曉科技新材料股份有限公司
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蘇州市工業(yè)園區(qū)裕新路108號
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