Seplife? RP LXMS-30(100)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一款中高壓色譜填料,是以聚苯乙烯/二乙烯基苯為基質(zhì)的多孔高聚物,其具有比表面積大、優(yōu)良的化學(xué)、物理穩(wěn)定性等特點(diǎn)。與傳統(tǒng)反相硅膠填料不耐酸堿,pH操作范圍窄相比,Seplife? RP LXMS-30(100)擁有高流速、高動(dòng)態(tài)載量的優(yōu)點(diǎn), 非常適合快速高效層析的應(yīng)用,在提高用戶生產(chǎn)效率的同時(shí),進(jìn)一步降低了用戶的生產(chǎn)成本。廣泛應(yīng)用于小分子化合物、多肽、低分子量的蛋白和其他生物分子進(jìn)行反相色譜(reversed phase chromatography RPC)分離。
產(chǎn)品牌號(hào) | Seplife? RP LXMS-30(100) |
外觀 | 白色球狀顆粒 |
化學(xué)結(jié)構(gòu) | |
基質(zhì) | 聚苯乙烯-二乙烯基苯 |
粒徑(μm) | 30±3 |
平均孔徑(?) | 100 |
濕視密度 (g/ml) | 0.80-0.90 |
含水量 (%) | 50-80 |
推薦工作流速(cm/h) | 100-1000 |
pH穩(wěn)定性 | 2~12(長(zhǎng)期),1~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 對(duì)常用的水性緩沖液穩(wěn)定,1M HCl, 1M HCl/90%甲醇,90% HAc,6M GuHCl, 100%正丙醇,100%乙醇,100%甲醇,100%丙酮,0.45MNaOH/40% 2-丙醇,1.0 M NaOH3,0.1% TFA在水中,0.1% TFA在乙腈中,100%異丙醇,100%四氫呋喃 |
動(dòng)態(tài)載量(mg/ml) | 32-40 mg(VB12); 30~60 mg (IN) |
耐壓(Mpa) | 4 |
存儲(chǔ) | 20%乙醇溶液,4℃至30℃ |
使用方法
勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果,其濃度為60%-70%。方法如下:
1)色譜柱的柱體積 V,V=Ac×L,Ac=π×r2。
Ac:色譜柱橫截面積;L:色譜柱高度;r:色譜柱半徑。
2) 攪動(dòng)介質(zhì)形成勻漿液,量取所需質(zhì)量或體積。其為柱體積的1.2倍左右,防止收縮。
3)用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇,平衡過(guò)夜。
4)裝柱之前,用 0.5 M NaCl 溶液調(diào)整勻漿濃度為 65 ~ 70%;將勻漿一次性倒入層析柱,沉降平衡后標(biāo)注高度。
5)將分配器裝入,調(diào)節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10;然后啟動(dòng)輸液泵,用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。
6)按照 SOP 進(jìn)行柱效和對(duì)稱(chēng)性的測(cè)定,須達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。
3.2 柱效評(píng)價(jià)
裝好之后,色譜柱用3-5CV超純水清洗。流速控制1-5cm/min平衡并進(jìn)行柱效測(cè)試。
離子交換層析柱的柱效測(cè)試方法
樣品: 2 M NaCl 溶液
上樣量: 1~5 % 柱體積
洗脫液: 0.5 M NaCl 溶液
線性流速: 100 cm/h
檢測(cè): UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣:電導(dǎo)檢測(cè)儀
3.3 清洗
裝好的色譜柱應(yīng)使用至少使用5CV的去離子水清洗。
3.4平衡
裝柱后先用流動(dòng)相平衡3-4CV,流速控制1-5cm/min,直到流穿的電導(dǎo)和pH保持不變方可進(jìn)行上樣。
3.5上樣
固體樣品可用平衡液溶解配制;低濃度樣品溶液盡量提前濃縮;高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。同時(shí)為了避免堵塞層析柱,樣品需要(離心或膜過(guò)濾)澄清處理。上樣量根據(jù)介質(zhì)的載量和樣品中目標(biāo)蛋白的濃度估算,上樣前請(qǐng)確保目標(biāo)物緩沖液應(yīng)盡可能與平衡液一致。首次試驗(yàn)可減小上樣量,之后可根據(jù)目標(biāo)物保留時(shí)間和峰型增加上樣量。
3.6 洗脫
采用2-10CV的甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等的(含水)溶液溶出,用酸、堿、緩沖液等調(diào)節(jié)PH值或兩者并用使有效成分洗脫。
3.7再生清洗(CIP)
先使用乙醇、丙酮、堿+乙醇等溶劑按操作流速?zèng)_洗3-4CV,然后用流動(dòng)相平衡清洗3-4CV。
3.8 應(yīng)用案例
Seplife? RP LXMS-30 具高流速、高動(dòng)態(tài)載量的特點(diǎn),非常適合快速高效層析的應(yīng)用。同時(shí),優(yōu)異的分辨率使其在精細(xì)純化階段具有比傳統(tǒng)離子交換層析介質(zhì)更好的雜質(zhì)去除能力。使用小分子茶堿驗(yàn)證層析柱分辨率,圖1分別顯示了Seplife? RP LXMS-30(A)與國(guó)際知名填料(B)同樣具有優(yōu)異的分辨率;圖2和圖3分別顯示了Seplife? RP LXMS-30 (A)與國(guó)際知名填料(B)在分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離效果圖譜。
圖1 A:Seplife? RP LXMS-30(100) 分離茶堿圖譜 B:國(guó)際某知名填料分離茶堿圖譜
圖2 Seplife? RP LXMS-30(100) 分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜
圖3 國(guó)際某知名填料分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜
4.存儲(chǔ)
暫時(shí)不使用的層析介質(zhì)需保存在 4~30 ℃ 的 20-25%乙醇中。
5.運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Seplife? RP LXMS-30(100) | PS00051X(30)2-1 | 25ml |
PS00051X(30)2-2 | 100ml | |
PS00051X(30)2-3 | 500ml | |
PS00051X(30)2-4 | 1L | |
PS00051X(30)2-5 | 5L | |
PS00051X(30)2-6 | 10L |
生產(chǎn)日期:見(jiàn)標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱(chēng)/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
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