Phenyl Large Scale HP層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型疏水層析介質(zhì)，是將苯基偶聯(lián)到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上形成的強(qiáng)疏水性層析介質(zhì)，它利用生物分子表面的疏水基團(tuán)與層析介質(zhì)上的疏水基團(tuán)相互作用強(qiáng)弱不同進(jìn)行分離，疏水性強(qiáng)、載量高、流速快，廣泛應(yīng)用于生物大分子的純化分離。
產(chǎn)品牌號(hào) | Phenyl Large Scale HP |
外觀 | 白色球狀凝膠，無臭無味 |
種類 | 強(qiáng)疏水填料 |
基質(zhì) | Large Scale HP微球 |
配基 | 苯基 |
粒徑d50v(μm) | ～40 |
pH穩(wěn)定性 | 3~13（長期），2~14（短期,在位清洗[CIP]） |
動(dòng)態(tài)載量QB10(mg /ml) | >19（HSA） |
配基密度(umol /ml) | >9 |
工作溫度 | 4~30℃ |
耐壓流速 | Deltacp 0.3MPa條件下， >220cm/h ，柱床高20cm |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 1mol/L 氫氧化鈉；70%乙醇；30%異丙醇； 0.5% SDS；10%乙二醇；6mol/L鹽酸胍；8mol/L尿素；3mol/L（NH4）2SO4 |
應(yīng)用 | 用于生物制藥和生物工程下游生物大分子的分離純化 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
使用2~5倍柱床體積的平衡緩沖溶液平衡柱子，直至流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液，如0.02~0.05mol/L的PBS中加1~2.5mol/L（NH4）2SO4等。
3.3上樣
（1）樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾以后上樣。
（2）一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)物。
（3）介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和溫度。鹽濃度大、溫度高或樣品組分疏水性強(qiáng)，介質(zhì)對(duì)組分吸附牢。
3.4洗脫
采用降低鹽濃度使吸附的生物分子被洗脫下來。添加表面活性劑或者有機(jī)溶劑可加強(qiáng)洗脫，最常用的是低鹽濃度緩沖液，如0.02~0.05 mol/L的PBS。
3.5 再生
（1）先用蒸餾水按操作流速?zèng)_洗3～5個(gè)柱床體積，然后用平衡液清洗3～5個(gè)柱床體積。
（2）再生時(shí)若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)洗不掉，可用在位清洗法除去。
3.6在位清洗
（1）對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可用0.5~1倍柱床體積的2M NaCl去除。
（2）對(duì)于沉淀蛋白、疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可以先用1倍柱床體積的0.1M NaOH沖洗，再用平衡緩沖溶液清洗直至pH呈中性。
（3）對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱床體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，需注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。
3.7存儲(chǔ)
密封保存在4~30℃（保存溶液為20%乙醇）干燥、通風(fēng)、清潔處，不可冷凍；用過的柱子保存在4~8℃，20%乙醇溶液中。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
注意事項(xiàng)
（1）典型的配基和蛋白質(zhì)結(jié)合強(qiáng)度由強(qiáng)到弱的順序是：苯基（phenyl）、辛基（octyl）、丁基（butyl）、異丙基（isopropyl）、醚（ether）。如果樣品和介質(zhì)結(jié)合緊密，可更換為弱介質(zhì)更容易洗脫下來。
（2）在疏水層析中，疏水介質(zhì)和疏水配基對(duì)選擇性影響非常大，以下因素的影響也不可忽視：樣品溶解度、純化規(guī)模、所需規(guī)模的正確配基。
（3）由于強(qiáng)疏水蛋白質(zhì)和疏水配基結(jié)合非常緊密，因此在篩選疏水介質(zhì)時(shí)，如果樣品是強(qiáng)疏水蛋白質(zhì)，可從低疏水性介質(zhì)開始，選擇在低鹽濃度下得到最高分辨率和載量的介質(zhì)。
（4）樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進(jìn)行柱層析。
（5）所裝的柱床必須表面平整，無溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。
（6）若是大規(guī)模純化和捕獲蛋白，采用非連續(xù)（間隔式）濃度變化洗脫，可以減少分離時(shí)間和緩沖液用量。
（7）加樣及整個(gè)洗脫過程中，嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Phenyl Large Scale HP | A3653202 | 25ml |
A3653203 | 100ml | |
A3653204 | 500ml | |
A3653205 | 1L | |
A3653206 | 5L | |
A3653207 | 10L |
生產(chǎn)日期：見標(biāo)簽
使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè)：西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址：西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
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