Seplife G100 SF層析介質(zhì)是一種具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物,它是由葡聚糖加入交聯(lián)劑環(huán)氧氯丙烷通過(guò)醚鍵互相交聯(lián)聚合而成,交聯(lián)度越大,網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)就越緊密,吸水后的體積膨脹就越小,能允許進(jìn)入層析介質(zhì)內(nèi)部的分子的分子量也就越小,反之亦然。層析時(shí),大于層析介質(zhì)孔徑的大分子,被阻于凝膠相外,沿著層析介質(zhì)顆粒之間的間隙走,下移速度最快,故最先洗脫下來(lái),中等大小的分子進(jìn)入部分層析介質(zhì)孔中,洗脫速度次之,而小分子因?yàn)槟軌蜻M(jìn)入全部層析介質(zhì)孔中,受到阻力最大,故最后被洗脫下來(lái),由此,物質(zhì)得到分離和純化。Seplife G100 SF層析介質(zhì)適用于蛋白分離純化、分子量測(cè)定、平衡常數(shù)測(cè)定、細(xì)胞分離等。
產(chǎn)品牌號(hào) | Seplife G100 SF |
外觀 | 白色球狀,無(wú)臭無(wú)味 |
粒徑(干,μm) | 10~40 |
溶脹度 | 15~20 |
分離范圍 | 4000~10×104 |
耐壓 | 遵從Darcy 定律 |
流速 | 遵從Darcy 定律 |
pH穩(wěn)定性 | 2~10 |
應(yīng)用 | 適用于蛋白分離純化、分子量測(cè)定、平衡常數(shù)測(cè)定、細(xì)胞分離等 |
使用方法
3.1預(yù)處理
葡聚糖凝膠過(guò)濾層析介質(zhì)一般是干粉狀態(tài),使用前必須在過(guò)剩的緩沖溶液(蒸餾水)中進(jìn)行溶脹(室溫溶脹過(guò)夜,或者在沸水中溶脹1h,避免使用磁力攪拌、藥匙或者玻璃棒攪拌造成填料損壞)。溶脹后,使用緩沖液進(jìn)行調(diào)節(jié),形成濃稠的漿液,75%(體積百分比)左右,再進(jìn)行脫氣。
注:在溶脹前加入緩沖溶液(蒸餾水)使其自然沉降,自然沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒多,需要重復(fù)多次漂洗將其除去,防止層析時(shí)阻塞凝膠柱,影響流速。
3.2 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.3平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。
3.4上樣
(1)介質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。
(2)凝膠過(guò)濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50 cm 以下,過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時(shí)高徑比為5:1即可。
(3)樣品中如有雜質(zhì)或沉淀應(yīng)該在上樣前過(guò)濾或離心除去,樣品的粘度不能過(guò)高,否則影響分離效果。
3.5洗脫
可以采用無(wú)鹽水,也可以采用用平衡緩沖液做洗脫劑進(jìn)行洗脫。在平衡緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或者鹽梯度洗脫都可以完全分離。
3.6在位清洗
凝膠使用10次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗4個(gè)柱床體積,再以至少3個(gè)柱床體積平衡緩沖液再生。
3.7存儲(chǔ)
干粉保存在4~30℃,干燥、通風(fēng)、清潔處;溶脹后的介質(zhì)保存在4~8℃,20%乙醇溶液中,避免與氧化劑接觸,不可冷凍。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
4.注意事項(xiàng)
(1)樣品必須澄清沒(méi)有顆粒。
(2)樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無(wú)溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(4)洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過(guò)快。
(5)加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中,嚴(yán)防柱面變干。
(6)本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Seplife G100 SF | D1007510SF | 25g |
D1007511SF | 100g | |
D1007512SF | 500g | |
D1007513SF | 1kg | |
D1007514SF | 5kg | |
D1007515SF | 10kg |
生產(chǎn)日期:見(jiàn)標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱(chēng)/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
郵政編碼:710076 傳真:029-8669 1600-8254
聯(lián)系電話(huà):86-29-8110 4050 官方網(wǎng)站:www.sunresin.com
注冊(cè)人名稱(chēng)/銷(xiāo)售企業(yè):蘇州藍(lán)曉生物科技有限公司
注冊(cè)人地址/銷(xiāo)售地址:蘇州市區(qū)工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)5樓525室
聯(lián)系電話(huà):0512-65160522
蘇州市工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)
0512-65160522
seplife@sunresin.com
官網(wǎng)二維碼 | 微信公眾號(hào) |