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          南昌Seplife? LXPM Q 5504M

          基本信息

          Seplife? LXPM Q 5504M層析介質是以聚丙烯酸酯為基質,在表面進行了親水性改性再鍵合了強堿性離子交換基團,具有載量高、化學穩(wěn)定性好、機械強度大、非特異性吸附小等特點,具有卓越的生物相容性和柱床穩(wěn)定性,可以提供更快的流速,特別適合大規(guī)模制備的應用,顯著提高了下游純化工藝的生產效率,可以降低成本……
          • 產品描述
          • 產品屬性參數(shù)
          • 說明書
          • 訂貨信息

          Seplife? LXPM Q 5504M層析介質是以聚丙烯酸酯為基質,在表面進行了親水性改性再鍵合了強堿性離子交換基團,具有載量高、化學穩(wěn)定性好、機械強度大、非特異性吸附小等特點,具有卓越的生物相容性和柱床穩(wěn)定性,可以提供更快的流速,特別適合大規(guī)模制備的應用,顯著提高了下游純化工藝的生產效率,可以降低成本,創(chuàng)造較好的經(jīng)濟效益,廣泛應用于抗體、蛋白質、多肽、核酸(寡核苷酸)、病毒,胰島素等生物分子的捕獲、中度純化、精細純化。

          骨架

          聚甲基丙烯酸甲酯

          外觀

          白色不透明球狀顆粒

          功能基團

          -O-R-N+-(CH3)3

          交換容量(mmol/mL)

          0.08-0.12

          平均粒徑(μm)

          80

          孔徑(?)

          1000

          載量(mg/ml,BSA)

          ≧95

          耐壓流速(cm/h)

          300-1000,22mm×20cm,3bar

          壓縮因子

          ≦1.05

          pH2-13

          耐壓(Mpa)

          0.8

          存儲 防腐劑

          20%乙醇溶液,150mol/l NaCl

          再生

          0.5-2M NaCl溶液

          清洗

          0.1-0.5M NaOH溶液(或者50%乙醇)

          穩(wěn)定性耐酸、耐堿、不溶于甲醇、乙醇、甲苯、DMSO、DMF、正庚烷等有機溶劑。


          使用方法

          3.1 裝柱

          勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果,其濃度為60%-70%。方法如下:

          1)色譜柱的柱體積 V,V=Ac×L,Ac=π×r2。

          Ac:色譜柱橫截面積;L:色譜柱高度;r:色譜柱半徑。

          2) 攪動介質形成勻漿液,量取所需質量或體積。其為柱體積的1.2倍左右,防止收縮。

          3)用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇,平衡過夜。

          4)裝柱之前,用 0.5 M NaCl 溶液調整勻漿濃度為 65 ~ 70%;將勻漿一次性倒入層析柱,沉降平衡后標注高度。

          5)將分配器裝入,調節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10;然后啟動輸液泵,用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。

          6)按照 SOP 進行柱效和對稱性的測定,須達到預定標準。 

          3.2 柱效評價 

          裝好之后,色譜柱用3-5體積超純水清洗。100cm/h流速平衡并進行柱效測試。

          離子交換層析柱的柱效測試方法

          樣品:      2 M NaCl 溶液 

          上樣量:    1~5 % 柱體積 

          洗脫液:    0.5 M NaCl 溶液 

          線性流速:  100 cm/h 

          檢測:      UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣:電導檢測儀

          3.3 清洗 

          裝好的色譜柱應使用至少使用5BV的去離子水清洗。 

          3.4 平衡 

          使用適當?shù)?-10倍柱體積緩沖液進行柱子的平衡,至流出液電導和PH不變(與平衡液一致),緩沖液 如 Buffer A,如 20 mM PBS, pH7.0,具體的緩沖體系應根據(jù)目標蛋白的穩(wěn)定性和等電點、離 子交換介質的種類進行篩選和優(yōu)化。 

          3.5上樣 

          固體樣品可用平衡液溶解配制;低濃度樣品溶液可用平衡液透析;高濃度樣品溶液可用 平衡液稀釋。為了避免堵塞層析柱,樣品應經(jīng)離心或膜過濾處理。進料量根據(jù)介質的載量和料液中目標蛋白的含量計算,上樣前確保樣品緩沖液應盡可能與平衡液一致。 

          3.6洗脫 

          上樣完畢后繼續(xù)用平衡緩沖液淋洗至基線穩(wěn)定,可以根據(jù)實際情況采取提高鹽濃度或改變流動相 pH 的方法依次洗脫吸附于層析介質上的樣品。 

          3.7再生 

          每次層析之后可用0.5-2 M NaCl 清洗層析柱,除去強結合于層析介質上的蛋白。 

          3.8 在位清洗 

          為了保持層析柱的性能,若有蛋白質或其他雜質在再生過程中未能有效去除,可執(zhí)行在位清洗步驟,在位清洗時,也可采用反向沖洗的方法,具體操作步驟如下: 

          (1)對于通過離子鍵結合過強的蛋白,可用3BV以上的2M NaCl 清洗,并用3BV以上的去離子水清洗; 

          (2)對沉淀蛋白、以疏水性結合的蛋白或脂蛋白,可用0.2~0.5 M NaOH 清洗(與層析介質接觸時間 1~2 h),并用5BV以上平衡液和3BV以上的去離子水清洗; 

          (3)對強疏水性結合的蛋白、脂蛋白和脂類物質,可用5BV以上的50%乙醇或 30%異丙醇 清洗(與層析介質接觸時間0.5-1 h),并用 5 BV 以上的去離子水清洗。也可用含非離子表面活性劑的堿性或酸性溶液清洗,如0.1~0.5%的 Triton X-100 + 0.1 M乙酸清洗 1-2 h,并用5BV以上的50%乙醇沖洗去除去污劑,然后用5BV以上的純水沖洗(使用高濃度的有機溶劑時,為了避免產生氣泡,應采用逐步增加有機溶劑濃度的方法)。 

          3.9 應用案列

          (1)5ml Seplife? LXPM Q5504M 預裝住

          (2)樣品:3mg/ml的β-乳球蛋白,5mg/ml的乳清蛋白混合液

          (3)波長:280nm

          (4)洗脫:緩沖液A1:20mMTris-HCl溶液,pH7.0,流速3ml/min;

          緩沖液B1:20mMTris-HCL溶液+0.5M NaCl,pH7.0,流速1ml/min

          (5)洗柱溶液:1 M NaOH溶液 超純水

          圖1.Seplife? LXPM Q5504M純化蛋白色譜圖

          4.存儲

          暫時不使用的層析介質需保存在 4~30℃ 的 20%乙醇中,已經(jīng)裝好的層析柱應保存在含 20%乙醇的緩沖液(pH 7.0);使用前請裝柱后將乙醇清洗干凈。

          5.運輸

          運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。


          產品牌號

          貨號

          包裝規(guī)格

          Seplife? LXPM Q5504M

          PM50324M1-1

          25ml

          PM50324M1-2

          100ml

          PM50324M1-3

          500ml

          PM50324M1-4

          1L

          PM50324M1-5

          5L

          PM50324M1-6

          10L

          生產日期:見標簽

          使用期限:在適當?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

          注冊人名稱/生產企業(yè):西安藍曉科技新材料股份有限公司

          注冊人住址/生產地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍曉科技園

          售后服務單位:西安藍曉科技新材料股份有限公司

          郵政編碼:710076

          聯(lián)系電話:86-29-8110 4050

          傳真:029-8669 1600-8254

          官方網(wǎng)站:www.sunresin.com

          注冊人名稱/銷售企業(yè):蘇州藍曉生物科技有限公司

          注冊人地址/銷售地址:蘇州市區(qū)工業(yè)園區(qū)裕新路108號5樓525室

          聯(lián)系電話:0512-65160522


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