南昌Blue Seplife FF

基本信息

Blue Seplife FF層析介質(zhì)是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質(zhì)，它是將藍色染料汽巴蘭（Cibacron Blue 3G-A）偶聯(lián)到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上。Blue Seplife FF與目標蛋白的結(jié)合主要是配基提供的電子對與疏水作用的綜合結(jié)果。該介質(zhì)具有良好的化學穩(wěn)定性，基團脫落少，使用壽命長，使用方便，應(yīng)用非常廣泛，可用于白蛋白、干擾素、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+酶的分離純化。

產(chǎn)品描述
產(chǎn)品屬性參數(shù)
說明書
訂貨信息

Blue Seplife FF層析介質(zhì)是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質(zhì)，它是將藍色染料汽巴蘭（Cibacron Blue 3G-A）偶聯(lián)到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上。Blue Seplife FF與目標蛋白的結(jié)合主要是配基提供的電子對與疏水作用的綜合結(jié)果。該介質(zhì)具有良好的化學穩(wěn)定性，基團脫落少，使用壽命長，使用方便，應(yīng)用非常廣泛，可用于白蛋白、干擾素、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+酶的分離純化。

產(chǎn)品牌號	Blue Seplife FF
外觀	白色球狀，無臭無味
基質(zhì)	Seplife 6FF
配基	汽巴蘭
最高流速（cm/h）	750
粒徑（μm）	45～165
配基密度（umol/ml）	7
結(jié)合載量（mg/ml）	＞18mg BSA/ml
pH穩(wěn)定性	3~13（長期）；4~12（短期，在位清洗[CIP]）
化學穩(wěn)定性	在以下溶液中穩(wěn)定：6M鹽酸胍；8M尿素；70%乙醇
耐熱性	121℃，水中20min
應(yīng)用	白蛋白、干擾素、凝血因子以及各種需要NAD+和NADP+的酶的分離

使用方法

3.1裝柱

裝柱按照標準操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.2平衡

用2～5個柱床體積的初始緩沖溶液進行平衡，直至pH和電導率保持不變。平衡緩沖液一般是根據(jù)需要純化的蛋白來決定用哪種緩沖液。

3.3上樣

（1）不同物質(zhì)和介質(zhì)會有強弱不同的結(jié)合能力，主要取決于流速、pH、緩沖溶液組成和溫度。

（2）樣品pH 應(yīng)該和平衡緩沖液pH相同，上樣前樣品應(yīng)該用0.22um或者0.45um的濾膜過濾，可以延長凝膠的使用壽命。

（3）上樣完后用緩沖液平衡，直至流出液電導和pH不變。

3.4洗脫

（1）洗脫液根據(jù)需要純化的樣品決定?？梢圆捎酶淖兙彌_液pH、極性或者離子強度。

（2）特異性吸附蛋白可以采用低濃度競爭洗脫、梯度或者線性洗脫。

3.5 再生

對于使用過的凝膠，先用2~3倍柱床體積的0.1mol/L Tris·HCl+0.5mol/L NaCl（pH8.5）和0.1mol/L NaAc+0.5mol/L NaCl（pH4.5）依次反復沖洗3~4次，然后用平衡緩沖溶液平衡。在一些應(yīng)用中，變性蛋白或者一些脂類物質(zhì)在再生步驟不會被洗脫掉，可以采用在位清洗（CIP）去除。

3.6在位清洗

層析純化過程中產(chǎn)生的沉淀或變性蛋白可用如下方法進行在位清洗：

（1）先用4倍柱床體積0.1M NaOH，流速40cm/h清洗；

（2）然后用3~4倍柱床體積2M硫氰酸鉀溶液清洗柱子；

（3）最后立即用至少5倍柱床體積的緩沖液平衡柱子（pH8.0）。

3.7存儲

保存在2~8℃，20%乙醇溶液中（pH8.0，含0.1M磷酸二氫鉀），干燥、通風、清潔處。避免與氧化劑接觸，不可冷凍。

3.8運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。

注意事項

（1）樣品必須澄清沒有顆粒。

（2）樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進行柱層析。