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          產(chǎn)品展示

          產(chǎn)品中心

          酒泉Seplife? LXPM DEAE 5504M

          基本信息

          Seplife? LXPM DEAE 5504M 層析介質(zhì)是以聚丙烯酸酯為基質(zhì),在表面進(jìn)行了親水性改性再鍵合了弱堿性離子交換基團(tuán),具有載量高、化學(xué)穩(wěn)定性好、機(jī)械強(qiáng)度大、非特異性吸附小等特點(diǎn),具有卓越的生物相容性和柱床穩(wěn)定性,可以提供更快的流速,特別適合大規(guī)模制備的應(yīng)用,顯著提高了下游純化工藝的生產(chǎn)效率,可以降低成本……
          • 產(chǎn)品描述
          • 產(chǎn)品屬性參數(shù)
          • 說(shuō)明書
          • 訂貨信息

          Seplife? LXPM DEAE 5504M 層析介質(zhì)是以聚丙烯酸酯為基質(zhì),在表面進(jìn)行了親水性改性再鍵合了弱堿性離子交換基團(tuán),具有載量高、化學(xué)穩(wěn)定性好、機(jī)械強(qiáng)度大、非特異性吸附小等特點(diǎn),具有卓越的生物相容性和柱床穩(wěn)定性,可以提供更快的流速,特別適合大規(guī)模制備的應(yīng)用,顯著提高了下游純化工藝的生產(chǎn)效率,可以降低成本,創(chuàng)造較好的經(jīng)濟(jì)效益,廣泛應(yīng)用于抗體、蛋白質(zhì)、多肽、核酸(寡核苷酸)、病毒,胰島素等生物分子的捕獲、中度純化、精細(xì)純化。  

          骨架

          聚甲基丙烯酸甲酯

          外觀

          白色不透明球狀顆粒

          功能基團(tuán)

          -O-(CH2)2-HN+-(C2H5)2

          交換容量(mmol/mL)

          0.08-0.12

          平均粒徑(μm)

          80

          孔徑(?)

          1000

          載量(mg/ml,BSA)

          ≧90 

          耐壓流速(cm/h)

          300-1000,22mm×20cm,3bar

          壓縮因子

          ≦1.05

          pH2-13

          耐壓(Mpa)

          0.8

          存儲(chǔ) 防腐劑

          20%乙醇溶液,150mol/l NaCl

          再生

          0.5-2M NaCl溶液

          清洗

          0.1-0.5M NaOH溶液(或者50%乙醇)

          穩(wěn)定性耐酸、耐堿、不溶于甲醇、乙醇、甲苯、DMSO、DMF、正庚烷等有機(jī)溶劑。


          使用方法

          3.1 裝柱

          勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果,其濃度為60%-70%。方法如下:

          1)色譜柱的柱體積 V,V=Ac×L,Ac=π×r2。

          Ac:色譜柱橫截面積;L:色譜柱高度;r:色譜柱半徑。

          2) 攪動(dòng)介質(zhì)形成勻漿液,量取所需質(zhì)量或體積。其為柱體積的1.2倍左右,防止收縮。

          3)用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇,平衡過(guò)夜。

          4)裝柱之前,用 0.5 M NaCl 溶液調(diào)整勻漿濃度為 65 ~ 70%;將勻漿一次性倒入層析柱,沉降平衡后標(biāo)注高度。

          5)將分配器裝入,調(diào)節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10;然后啟動(dòng)輸液泵,用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。

          6)按照 SOP 進(jìn)行柱效和對(duì)稱性的測(cè)定,須達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。 

          3.2 柱效評(píng)價(jià) 

          裝好之后,色譜柱用3-5體積超純水清洗。100cm/h流速平衡并進(jìn)行柱效測(cè)試。

          離子交換層析柱的柱效測(cè)試方法

          樣品:      2 M NaCl 溶液 

          上樣量:    1~5 % 柱體積 

          洗脫液:    0.5 M NaCl 溶液 

          線性流速:  100 cm/h 

          檢測(cè):      UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣:電導(dǎo)檢測(cè)儀

          3.3 清洗 

          裝好的色譜柱應(yīng)使用至少使用5BV的去離子水清洗。 

          3.4 平衡 

          使用適當(dāng)?shù)?-10倍柱體積緩沖液進(jìn)行柱子的平衡,至流出液電導(dǎo)和PH不變(與平衡液一致),緩沖液 如 Buffer A,如 20 mM PBS, pH7.0,具體的緩沖體系應(yīng)根據(jù)目標(biāo)蛋白的穩(wěn)定性和等電點(diǎn)、離 子交換介質(zhì)的種類進(jìn)行篩選和優(yōu)化。 

          3.5上樣 

          固體樣品可用平衡液溶解配制;低濃度樣品溶液可用平衡液透析;高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。為了避免堵塞層析柱,樣品應(yīng)經(jīng)離心或膜過(guò)濾處理。進(jìn)料量根據(jù)介質(zhì)的載量和料液中目標(biāo)蛋白的含量計(jì)算,上樣前確保樣品緩沖液應(yīng)盡可能與平衡液一致。 

          3.6洗脫 

          上樣完畢后繼續(xù)用平衡緩沖液淋洗至基線穩(wěn)定,可以根據(jù)實(shí)際情況采取提高鹽濃度或改變流動(dòng)相 pH 的方法依次洗脫吸附于層析介質(zhì)上的樣品。 

          3.7再生 

          每次層析之后可用0.5-2 M NaCl 清洗層析柱,除去強(qiáng)結(jié)合于層析介質(zhì)上的蛋白。 

          3.8 在位清洗 

          為了保持層析柱的性能,若有蛋白質(zhì)或其他雜質(zhì)在再生過(guò)程中未能有效去除,可執(zhí)行在位清洗步驟,在位清洗時(shí),也可采用反向沖洗的方法,具體操作步驟如下: 

          (1)對(duì)于通過(guò)離子鍵結(jié)合過(guò)強(qiáng)的蛋白,可用3BV以上的2M NaCl 清洗,并用3BV以上的去離子水清洗; 

          (2)對(duì)沉淀蛋白、以疏水性結(jié)合的蛋白或脂蛋白,可用0.2~0.5 M NaOH 清洗(與層析介質(zhì)接觸時(shí)間 1~2 h),并用5BV以上平衡液和3BV以上的去離子水清洗; 

          (3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂蛋白和脂類物質(zhì),可用5BV以上的50%乙醇或 30%異丙醇 清洗(與層析介質(zhì)接觸時(shí)間0.5-1 h),并用 5 BV 以上的去離子水清洗。也可用含非離子表面活性劑的堿性或酸性溶液清洗,如0.1~0.5%的 Triton X-100 + 0.1 M乙酸清洗 1-2 h,并用5BV以上的50%乙醇沖洗去除去污劑,然后用5BV以上的純水沖洗(使用高濃度的有機(jī)溶劑時(shí),為了避免產(chǎn)生氣泡,應(yīng)采用逐步增加有機(jī)溶劑濃度的方法)。

          3.9 應(yīng)用案列

          (1)5ml Seplife? LXPM DEAE 5504M預(yù)裝柱

          (2)樣品:20 mg/ml 糜蛋白酶(粗品)

          (3)波長(zhǎng):280nm,流速:3ml/min

          (4)洗脫:緩沖液A1:50mMTris-HCL溶液,pH10.0

          緩沖液B1:50mMTris-HCL溶液+1M NaCL,pH10.

          (5)洗柱溶液:1 M NaOH溶液 超純水


          圖1.Seplife? LXPM DEAE 5504M與某外樣分離粗糜樣品色譜圖疊加

          4.存儲(chǔ)

          暫時(shí)不使用的層析介質(zhì)需保存在 4~30℃ 的 20%乙醇中,已經(jīng)裝好的層析柱應(yīng)保存在含 20%乙醇的緩沖液(pH 7.0);使用前請(qǐng)裝柱后將乙醇清洗干凈。

          5.運(yùn)輸

          運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。


          產(chǎn)品牌號(hào)

          貨號(hào)

          包裝規(guī)格

          Seplife? LXPM DEAE5504M 

          PM50424M1-1

          25ml

          PM50424M1-2

          100ml

          PM50424M1-3

          500ml

          PM50424M1-4

          1L

          PM50424M1-5

          5L

          PM50424M1-6

          10L

          生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽

          使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

          注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

          注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園

          售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

          郵政編碼:710076

          聯(lián)系電話:86-29-8110 4050

          傳真:029-8669 1600-8254

          官方網(wǎng)站:www.sunresin.com

          注冊(cè)人名稱/銷售企業(yè):蘇州藍(lán)曉生物科技有限公司

          注冊(cè)人地址/銷售地址:蘇州市區(qū)工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)5樓525室

          聯(lián)系電話:0512-65160522


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