Seplife? LXMS 30Q是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一款離子交換填料,以高交聯(lián)的多孔聚苯乙烯/二乙烯苯(PS/DVB)單分散微球?yàn)榛|(zhì),在微球表面鍵合了化學(xué)穩(wěn)定性極高的親水層。Seplife? LXMS 30Q具有高流速、高分辨率、高載量、高剛性,良好的生物相容性和物理化學(xué)穩(wěn)定性等特點(diǎn)。與傳統(tǒng)層析填料相比,顯著提高了下游純化工藝的生產(chǎn)效率和樣品回收率,廣泛應(yīng)用于抗體、蛋白質(zhì)、多肽、核酸等生物分子的捕獲、中度純化、精細(xì)純化。
產(chǎn)品牌號 | Seplife? LXMS 30Q |
外觀 | 白色不透明球狀顆粒,無臭無味 |
種類 | 強(qiáng)陰離子交換填料 |
基質(zhì) | 聚苯乙烯/二乙烯苯 |
配基 | 季胺基 |
d50v(μm) | 30 |
壓力流速*(cm/h) | 100-900 |
pH穩(wěn)定性 | 2~12(長期),1~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 所有常用的離子交換緩沖液 |
離子交換量(mmol /ml) | 0.07-0.10 |
動(dòng)態(tài)載量(mg/ml) | ≧55(BSA) |
最大耐壓(bar) | 30 |
*檢測條件:層析柱16mm×200mm;*柱床高10cm;溫度25℃;流動(dòng)相為0.1mol/L NaCl
使用方法
3.1 裝柱
勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果,其濃度為60%-70%。方法如下:
1)色譜柱的柱體積 V,V=Ac×L,Ac=π×r2。
Ac:色譜柱橫截面積;L:色譜柱高度;r:色譜柱半徑。
2) 攪動(dòng)介質(zhì)形成勻漿液,量取所需質(zhì)量或體積。其為柱體積的1.2倍左右,防止收縮。
3)用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇,平衡過夜。
4)裝柱之前,用 0.5 M NaCl 溶液調(diào)整勻漿濃度為 65 ~ 70%;將勻漿一次性倒入層析柱,沉降平衡后標(biāo)注高度。
5)將分配器裝入,調(diào)節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10;然后啟動(dòng)輸液泵,用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。
6)按照 SOP 進(jìn)行柱效和對稱性的測定,須達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。
3.2 柱效評價(jià)
裝好之后,色譜柱用3-5體積超純水清洗。100cm/h流速平衡并進(jìn)行柱效測試。
離子交換層析柱的柱效測試方法
樣品: 2 M NaCl 溶液
上樣量: 1~5 % 柱體積
洗脫液: 0.5 M NaCl 溶液
線性流速: 100 cm/h
檢測: UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣:電導(dǎo)檢測儀
3.3 清洗
裝好的色譜柱應(yīng)使用至少使用5BV的去離子水清洗。
3.4平衡
裝柱后先用流動(dòng)相平衡,5-10個(gè)柱體積,流速控制2-5cm/min,直到流穿的電導(dǎo)和pH保持不變方可進(jìn)行上樣。
3.5上樣
固體樣品可用平衡液溶解配制;低濃度樣品溶液盡量提前濃縮;高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。同時(shí)為了避免堵塞層析柱,樣品需要(離心或膜過濾)澄清處理。上樣量根據(jù)介質(zhì)的載量和樣品中目標(biāo)蛋白的濃度估算,上樣前請確保目標(biāo)物緩沖液應(yīng)盡可能與平衡液一致。
3.6 洗脫
上樣完畢后繼續(xù)用平衡緩沖液淋洗至基線穩(wěn)定, 可以根據(jù)實(shí)際情況采取改變鹽濃度或流動(dòng)相 pH 的方法依次洗脫吸附于層析介質(zhì)上的樣品。
3.7再生清洗(CIP)
定期 CIP 清洗,可以防止柱床中蛋白質(zhì)沉淀污染物的富集,有助于保持層析介質(zhì)的載量、分離效果。一般來說需要根據(jù)污染物類型為每個(gè)工藝設(shè)計(jì)特定的CIP 清洗方法和CIP 清洗的頻率。推薦 CIP 清洗方法如下:先用 5 BV 1-2 M 的 NaCl 淋洗,然后用5 BV 0.5-1 M 的 NaOH 清洗。
3.8應(yīng)用案例
圖1.國際知名填料分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜
圖2.Seplife? LXMS 30Q分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜
4.存儲
暫時(shí)不使用的層析介質(zhì)需保存在 4~30 ℃ 的 20%乙醇或者10mM NaOH溶液中,已經(jīng)裝好的層析柱應(yīng)保存在含 20%乙醇的緩沖液(pH 7.0);使用前請裝柱后將乙醇清洗干凈。
5.運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
產(chǎn)品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
Seplife? LXMS 30Q | PS40323X(30)1-1 | 25ml |
PS40323X(30)1-2 | 100ml | |
PS40323X(30)1-3 | 500ml | |
PS40323X(30)1-4 | 1L | |
PS40323X(30)1-5 | 5L | |
PS40323X(30)1-6 | 10L |
生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
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