DEAE Seplife A50層析介質是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的葡聚糖層析介質,具有高流速、低反壓、高動態(tài)載量及良好的化學穩(wěn)定性。DEAE seplife? A-50層析介質方便進行規(guī)模放大,可以縮短生產時間,提高生產效率,降低大規(guī)模生產成本。
產品牌號 | DEAE Seplife A50 |
外觀 | 白色粉末,無臭無味 |
種類 | 弱陰離子交換填料 |
基質 | 葡聚糖G50 |
配基 | 二乙胺基乙基 |
形態(tài) | 氯型 |
粒徑(μm) | 40~120(干粉) |
pH工作范圍 | 2~9 |
pH穩(wěn)定性 | 2~12(長期),2~12(短期) |
化學穩(wěn)定性 | 以下溶液中穩(wěn)定:常用的水相緩沖溶液:如8M尿素、6 M鹽酸胍 |
吸附量(mg /ml) | 110 (白蛋白) |
離子交換量(mmol /g干膠) | 3.0~4.0 |
耐熱性 | 121℃,0.1M NaCl溶液30min |
應用 | 用于生物制藥和生物工程下游蛋白質、核酸及多肽的離子交換層析純化 |
使用方法
DEAE Seplife A50是粉末狀,使用時需要溶脹,其溶脹比取決于所使用的緩沖溶液,不同溶液中的溶脹比不同,而且存在較大差異。溶脹時不能使用磁力攪拌,否則易導致凝膠破碎。
3.1預處理
稱取所需量的DEAE Seplife A50(以下簡稱A-50),置于50~100倍蒸餾水或者上樣平衡液中,溶脹,室溫條件下一般需要溶脹1~2天,沸水中一般需要2小時。
3.2 裝柱
裝柱按照標準操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
備注:如果以最大線性流速裝柱子,在隨后的色譜分離過程中流速不要超過裝柱流速
的75%。
3.3平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務必使流出液的電導和pH同上樣緩沖液的電導和pH完全一致。
3.4上樣
根據目標產物濃度和凝膠的載量確定上樣量。
3.5清洗
上樣完畢后,再使用上樣緩沖液平衡柱子,清洗掉不結合的蛋白和雜質,直至流出液的電導和pH同上樣緩沖液的電導和pH完全一致。
3.6洗脫
對于DEAE Seplife A50使用增大緩沖液中鹽離子濃度的方法連續(xù)洗脫或者梯度洗脫。
3.7 再生
在柱上先以1~2M NaCl洗去柱上的雜蛋白,再以蒸餾水洗去柱中鹽。然后按預處理過程將A-50再處理一遍即可。
3.8存儲
DEAE Seplife A50干粉保存于4~30℃、干燥、通風、清潔處;溶脹后的凝膠保存于4~8℃,20%乙醇或者0.1M NaOH溶液中。
3.9運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴禁與有毒、有害物品混運。
4.注意事項
(1)柱的選擇:從理論上說,只要柱足夠長,就可以獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關,柱長增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低;柱的直徑增加,使液體流動的不均勻性增加,分辨率明顯下降。
(2)純化過程必須嚴格控制洗脫緩沖液的pH及離子強度。樣品與DEAE seplife? A-50必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應重裝。
(4)洗脫過程中應嚴格控制流速,且勿過快。
(5)上樣的體積要小,濃度不宜過高。
(6)加樣及整個洗脫過程中,嚴防柱面變干。
產品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
DEAE Seplife A50 | D2017310 | 25g |
D2017311 | 100g | |
D2017312 | 500g | |
D2017313 | 1kg | |
D2017314 | 5kg | |
D2017315 | 10kg |
生產日期:見標簽
使用期限:在適當的貯藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產企業(yè):西安藍曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍曉科技園
售后服務單位:西安藍曉科技新材料股份有限公司
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