Q Large Scale層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的瓊脂糖層析介質(zhì),是將三甲胺基烷基季銨基團(tuán)鍵合在高流速瓊脂糖微球上形成的一種強(qiáng)陰離子交換介質(zhì),其具有高流速、低反壓、高動(dòng)態(tài)載量、良好的化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械性能,非特異性吸附低,回收率高,方便進(jìn)行規(guī)模放大,可縮短生產(chǎn)時(shí)間,提高生產(chǎn)效率。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備,還可用于內(nèi)毒素的去除。
產(chǎn)品牌號(hào) | Q Large Scale |
外觀(guān) | 白色球狀,無(wú)臭無(wú)味 |
種類(lèi) | 強(qiáng)陰離子交換填料 |
基質(zhì) | Large Scale微球 |
配基 | 三甲胺基烷基季銨基團(tuán) |
形態(tài) | 氯型 |
粒徑 d50v(μm) | ~90 |
pH穩(wěn)定性 | 2~12(長(zhǎng)期),1~14(短期,在位清洗[CIP]) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在以下液體中穩(wěn)定:所有常用的水相緩沖液;1mol/L 氫氧化鈉;8mol/L 尿素;6mol/L 鹽酸胍;70% 乙醇;30%異丙醇;1M 醋酸 |
動(dòng)態(tài)載量,QB,10% (mg /ml) | >100mgBSA /ml |
離子交換量(mmol /ml) | 0.16~0.22 |
工作溫度 | 4~30℃ |
耐熱性 | 121℃,水中30min |
耐壓流速 | 柱床高20cm,壓力0.3MPa,流速大于700cm/h |
應(yīng)用 | 用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換層析純化 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。平衡液是低濃度的緩沖溶液,如Tris、PBS等。
3.3上樣
(1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。
(2)一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
(3)介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度小,介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附較牢。用該層析介質(zhì)時(shí),推薦的pH值是大于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn)1個(gè)單位。
3.4洗脫
常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
3.5再生
一般先用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗脫10倍以上柱體積,然后用結(jié)合蛋白時(shí)的平衡液洗到平衡即可。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類(lèi)物質(zhì)再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
3.6在位清洗
(1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床體積的2M NaCl去除。
(2)對(duì)于沉淀蛋白、疏水性結(jié)合的蛋白或脂類(lèi),可以先用1倍柱床體積的0.1M NaOH沖洗,再用平衡緩沖溶液清洗直至pH呈中性。
(3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類(lèi)等,用4~10倍柱床體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,需注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
3.7存儲(chǔ)
密封保存在4~30℃(保存溶液為20%乙醇)干燥、通風(fēng)、清潔處,不可冷凍;用過(guò)的柱子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
注意事項(xiàng)
(1)柱的選擇:從理論上說(shuō),只要柱足夠長(zhǎng),就可以獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān),柱長(zhǎng)增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低;柱的直徑增加,使液體流動(dòng)的不均勻性增加,分辨率明顯下降。
(2)純化過(guò)程必須嚴(yán)格控制洗脫緩沖液的pH及離子強(qiáng)度。樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無(wú)溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(4)洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過(guò)快。
(5)上樣的體積要小,濃度不宜過(guò)高。
(6)加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中,嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Q Large Scale | A2036302 | 25ml |
A2036303 | 100ml | |
A2036304 | 500ml | |
A2036305 | 1L | |
A2036306 | 5L | |
A2036307 | 10L |
生產(chǎn)日期:見(jiàn)標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱(chēng)/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
郵政編碼:710076
聯(lián)系電話(huà):86-29-8110 4050
傳真:029-8669 1600-8254
官方網(wǎng)站:www.sunresin.com
注冊(cè)人名稱(chēng)/銷(xiāo)售企業(yè):蘇州藍(lán)曉生物科技有限公司
注冊(cè)人地址/銷(xiāo)售地址:蘇州市區(qū)工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)5樓525室
聯(lián)系電話(huà):0512-65160522
蘇州市工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)
0512-65160522
seplife@sunresin.com
官網(wǎng)二維碼 | 微信公眾號(hào) |