SP Seplife XL層析介質(zhì)是藍曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的瓊脂糖層析介質(zhì)，是在高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上嫁接葡聚糖“觸手”，然后偶聯(lián)磺酸基丙基形成的一種強陽離子交換介質(zhì)。SP Seplife XL層析介質(zhì)具有超高載量、高流速、低反壓、良好的化學(xué)穩(wěn)定性和機械性能，非特異性吸附低，回收率高，方便進行規(guī)模放大，可縮短生產(chǎn)時間，提高生產(chǎn)效率,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換分離。

＊檢測條件：層析柱16mm×300mm；＊柱床高15cm；溫度25℃；流動相為0.1mol/L NaCl。

使用方法

3.1 裝柱

裝柱按照標準操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度，凝膠裝柱前需要脫氣。

3.2平衡

使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子，務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。平衡液是低濃度的緩沖溶液，如NaOAC、PBS等。常用的平衡液是0.1mol/L 醋酸緩沖液，pH5.0。

3.3上樣

（1）樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。

（2）一般情況是讓目標產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標產(chǎn)品。

（3）介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動相的離子強度和pH值。鹽濃度小，介質(zhì)對樣品組分吸附較牢。用 SP層析介質(zhì)時，推薦的pH值是大于目標產(chǎn)品等電點1個單位。

3.4洗脫

可用增大鹽濃度或增大pH值進行洗脫，常用增大鹽濃度的辦法洗脫。常用的洗脫液（B液）如：0.1mol/L 醋酸緩沖液+2mol/L NaCl，pH5.0。

3.5再生

一般先用高鹽濃度的緩沖液（含1~2mol/L NaCl）洗或減小pH洗10倍以上柱體積，然后用結(jié)合蛋白時的平衡液洗到平衡即可。

若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

3.6在位清洗

（1）對于沉淀或失活蛋白質(zhì)，可先用2倍柱床體積6M 鹽酸胍沖洗，然后用至少5倍柱床體積的無菌平衡緩沖溶液，pH7~8，反相沖洗。

（2）對強疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，先用2倍柱床體積的非離子去污劑（濃度0.1%）沖洗，然后用至少5倍柱床體積的無菌平衡緩沖溶液，pH7~8，反相沖洗。或者先用3~4倍柱床體積的70%乙醇溶液沖洗，然后用至少5倍柱床體積的無菌平衡緩沖溶液，pH7~8，反相沖洗。需注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。

3.7存儲

密封保存在4~30℃（保存溶液為20%乙醇+0.2mol/L乙酸鈉）干燥、通風(fēng)、清潔處，不可冷凍；用過的柱子保存在4~8℃，20%乙醇溶液+0.2mol/L乙酸鈉中。

3.8運輸

運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴禁與有毒、有害物品混運。

4.注意事項

（1）柱的選擇：從理論上說，只要柱足夠長，就可以獲得理想的分辨率，但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān)，柱長增加使流速減慢，峰變寬，分辨率降低；柱的直徑增加，使液體流動的不均勻性增加，分辨率明顯下降。 

（2）純化過程必須嚴格控制洗脫緩沖液的pH及離子強度。樣品與 SP層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后，才能進行柱層析。 

（3）所裝的柱床必須表面平整，無溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。

（4）洗脫過程中應(yīng)嚴格控制流速，且勿過快。

（5）上樣的體積要小，濃度不宜過高。

生產(chǎn)日期：見標簽

使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

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