Seplife? RP LXMS-30(300)是藍曉科技自主研發(fā)的一款中高壓色譜填料，是以聚苯乙烯/二乙烯基苯為基質(zhì)的多孔高聚物，其具有比表面積大、優(yōu)良的化學(xué)、物理穩(wěn)定性等特點。與傳統(tǒng)反相硅膠填料不耐酸堿，pH操作范圍窄相比，Seplife? RP LXMS-30(100)擁有高流速、高動態(tài)載量的優(yōu)點， 非常適合快速高效層析的應(yīng)用，在提高用戶生產(chǎn)效率的同時，進一步降低了用戶的生產(chǎn)成本。廣泛應(yīng)用于小分子化合物、多肽、低分子量的蛋白和其他生物分子進行反相色譜（reversed phase chromatography RPC）分離。
產(chǎn)品牌號 | Seplife? RP LXMS-30(100) |
外觀 | 白色球狀顆粒 |
化學(xué)結(jié)構(gòu) |
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基質(zhì) | 聚苯乙烯-二乙烯基苯 |
粒徑（μm） | 30±3 |
平均孔徑（?） | 100 |
濕視密度 (g/ml) | 0.80-0.90 |
含水量 (%) | 50-80 |
推薦工作流速（cm/h） | 100-1000 |
pH穩(wěn)定性 | 2~12（長期），1~14（短期，在位清洗[CIP]） |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 對常用的水性緩沖液穩(wěn)定，1M HCl, 1M HCl/90%甲醇，90% HAc，6M GuHCl, 100%正丙醇，100%乙醇，100%甲醇，100%丙酮，0.45MNaOH/40% 2-丙醇，1.0 M NaOH3，0.1% TFA在水中，0.1% TFA在乙腈中，100%異丙醇，100%四氫呋喃 |
動態(tài)載量（mg/ml） | 32-40 mg（VB12）； 30~60 mg (IN) |
耐壓（Mpa） | 4 |
存儲 | 20%乙醇溶液，4℃至30℃ |
使用方法
勻漿濃度等于靜置膠體積除以除以勻漿后的總體積。采用0.5M NaCl勻漿可獲得最佳裝柱效果，其濃度為60%-70%。方法如下：
1)色譜柱的柱體積 V，V=Ac×L，Ac=π×r2。
Ac：色譜柱橫截面積；L:色譜柱高度；r：色譜柱半徑。
2) 攪動介質(zhì)形成勻漿液，量取所需質(zhì)量或體積。其為柱體積的1.2倍左右，防止收縮。
3）用 0.5 M NaCl 溶液置換20%乙醇，平衡過夜。
4）裝柱之前，用 0.5 M NaCl 溶液調(diào)整勻漿濃度為 65 ~ 70%；將勻漿一次性倒入層析柱，沉降平衡后標(biāo)注高度。
5）將分配器裝入，調(diào)節(jié)高度使得壓縮系數(shù)為 1.05 ~ 1.10；然后啟動輸液泵，用 1.5~2 倍工作流速使柱床穩(wěn)定。
6）按照 SOP 進行柱效和對稱性的測定，須達到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。
3.2 柱效評價
裝好之后，色譜柱用3-5CV超純水清洗。流速控制1-5cm/min平衡并進行柱效測試。
離子交換層析柱的柱效測試方法
樣品： 2 M NaCl 溶液
上樣量： 1~5 % 柱體積
洗脫液： 0.5 M NaCl 溶液
線性流速： 100 cm/h
檢測： UV @ 280 nm ,2 M NaCl 上樣：電導(dǎo)檢測儀
3.3 清洗
裝好的色譜柱應(yīng)使用至少使用5CV的去離子水清洗。
3.4平衡
裝柱后先用流動相平衡3-4CV，流速控制1-5cm/min，直到流穿的電導(dǎo)和pH保持不變方可進行上樣。
3.5上樣
固體樣品可用平衡液溶解配制；低濃度樣品溶液盡量提前濃縮；高濃度樣品溶液可用平衡液稀釋。同時為了避免堵塞層析柱，樣品需要（離心或膜過濾）澄清處理。上樣量根據(jù)介質(zhì)的載量和樣品中目標(biāo)蛋白的濃度估算，上樣前請確保目標(biāo)物緩沖液應(yīng)盡可能與平衡液一致。首次試驗可減小上樣量，之后可根據(jù)目標(biāo)物保留時間和峰型增加上樣量。
3.6 洗脫
采用2-10CV的甲醇、乙醇、乙腈、丙酮等的（含水）溶液溶出，用酸、堿、緩沖液等調(diào)節(jié)PH值或兩者并用使有效成分洗脫。
3.7再生清洗（CIP）
先使用乙醇、丙酮、堿+乙醇等溶劑按操作流速沖洗3-4CV，然后用流動相平衡清洗3-4CV。
3.8 應(yīng)用案例
Seplife? RP LXMS-30 具高流速、高動態(tài)載量的特點，非常適合快速高效層析的應(yīng)用。同時，優(yōu)異的分辨率使其在精細純化階段具有比傳統(tǒng)離子交換層析介質(zhì)更好的雜質(zhì)去除能力。使用小分子茶堿驗證層析柱分辨率，圖1分別顯示了Seplife? RP LXMS-30 (A)與國際之名填料(B)同樣具有優(yōu)異的分辨率；圖2和圖3分別顯示了Seplife? RP LXMS-30 (A)與國際之名填料(B)在分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分離效果圖譜。
圖1 A:Seplife? RP LXMS-30(300) 分離茶堿圖譜 B:國際某知名填料分離茶堿圖譜
圖2 Seplife? RP LXMS-30(300) 分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜
圖3 國際某知名填料分離標(biāo)準(zhǔn)蛋白圖譜
4.存儲
暫時不使用的層析介質(zhì)需保存在 4～30 ℃ 的 20-25%乙醇中。
5.運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運。
產(chǎn)品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
Seplife? RP LXMS-30(300) | PS00042X(30)2-1 | 25ml |
PS00042X(30)2-2 | 100ml | |
PS00042X(30)2-3 | 500ml | |
PS00042X(30)2-4 | 1L | |
PS00042X(30)2-5 | 5L | |
PS00042X(30)2-6 | 10L |
生產(chǎn)日期：見標(biāo)簽
使用期限：在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè)：西安藍曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產(chǎn)地址：西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍曉科技園
售后服務(wù)單位：西安藍曉科技新材料股份有限公司
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