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          潮州Seplife? Oligo dT(20)

          基本信息

          Seplife? Oligo dT(20)是一種親和層析填料,專門用于從復(fù)雜體系中捕獲信使 RNA (mRNA),從而提高其純度。高度交聯(lián)的苯乙烯/二乙烯基苯 (DVB)基質(zhì)提供剛性多孔基質(zhì),在其上進(jìn)行親水改造,用(dT)基團(tuán)進(jìn)行功能化。 親水改造的作用是最大限度地減少非特異性相互作用,而功能基團(tuán)poly(DT)則通過堿基配對(duì)與mRNA的polyA尾特異性相互作用。
          • 產(chǎn)品描述
          • 產(chǎn)品屬性參數(shù)
          • 說明書
          • 訂貨信息

          Seplife? Oligo dT(20)是一種親和層析填料,專門用于從復(fù)雜體系中捕獲信使 RNA (mRNA),從而提高其純度。高度交聯(lián)的苯乙烯/二乙烯基苯 (DVB)基質(zhì)提供剛性多孔基質(zhì),在其上進(jìn)行親水改造,用(dT)基團(tuán)進(jìn)行功能化。

          親水改造的作用是最大限度地減少非特異性相互作用,而功能基團(tuán)poly(DT)則通過堿基配對(duì)與mRNA的polyA尾特異性相互作用。

          Seplife? Oligo dT(20) 具有以下特性:

          ◆粒度分布均勻,為50微米。

          高載量

          高耐鹽、耐壓性能

          pH范圍穩(wěn)定性

          在各種溫度范圍內(nèi)保持穩(wěn)定

          在標(biāo)準(zhǔn)純化條件下有效捕獲和釋放mRNA

          Seplife?Oligo dT(20)是一種平均粒徑為50微米的親和色譜樹脂,專為從復(fù)雜混合物中高效捕獲mRNA而設(shè)計(jì)。


          技術(shù)指標(biāo)

          產(chǎn)品名稱Seplife? Oligo dT (20)
          外觀白色球狀
          種類

          含有dT(20)官能團(tuán)的親和層析

          基質(zhì)

          聚苯乙烯-二乙烯

          配基密度(umol dT/mL )0.25-0.35

          平均粒徑(μm)

          50
          pH穩(wěn)定性2~13 

          化學(xué)穩(wěn)定性

          在5M NaCl溶液中穩(wěn)定,室溫下在20%和70%乙醇、20%乙腈和30%異丙醇水溶液中穩(wěn)定。建議使用0.1M氫氧化鈉進(jìn)行原位清洗

          流速(cm/h)

          >400cm/h,0.3Mpa(0.1M NaCl)

          建議工作溫度(℃)

          2-65
          儲(chǔ)存溶液20%乙醇溶液


          使用方法

          3.1裝柱方法

          應(yīng)按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行柱填充。確保每種材料都處于其工作溫度非常重要。

          Seplife? Oligo dT(20)填料以裝在20%乙醇溶液中提供。為了確定填充指定層析柱所需的填料體積,必須確定或考慮漿液濃度和壓縮系數(shù)。Seplife? Oligo dT(20) 填料的壓縮系數(shù)為 1.12 ;壓縮系數(shù)由重力沉降體積與填料床體積之比確定。

          可采用兩種裝柱程序:恒壓裝柱和恒流裝柱。

          3.2平衡

          使用約5CV的適當(dāng)緩沖液平衡柱。確保流出液的電導(dǎo)率和 pH 值與平衡緩沖液完全相同。平衡溶液可以是中性pH緩沖液,例如Tris或磷酸鹽緩沖液,例如10mM Tris-HCl、0.5M NaCl、1mM EDTA (pH 7.4) 。高電導(dǎo)率可促進(jìn)填料上的poly DT與mRNA分子的poly A 之間的親和相互作用,因此通常使用至少0.2 -0.5M的NaCl 濃度。平衡緩沖液應(yīng)具有合適的電導(dǎo)率以促進(jìn) mRNA 結(jié)合。

          3.3樣品制備

          mRNA樣品應(yīng)在與平衡緩沖液相似的緩沖液中制備,且緩沖液的電導(dǎo)率要適宜。如果RNA 樣品需要變性,則將樣品在65-70 oC下加熱10-15分鐘,然后立即放入冰浴中。這種處理有助于破壞二級(jí)結(jié)構(gòu),并可能提高純化性能。

          mRNA的大小和結(jié)構(gòu)可能有很大差異,這會(huì)影響其與 Seplife? Oligo dT(20)的結(jié)合能力。樣品溶解度、濃度、雜質(zhì)分布以及緩沖液成分會(huì)影響與 Seplife? Oligo dT(20) 的結(jié)合能力,因此應(yīng)進(jìn)行優(yōu)化。通常,樣品應(yīng)用的保留時(shí)間至少為3分鐘。

          確保樣品經(jīng)過過濾(0.22μm 或 0.45μm 過濾器),并且如果可能的話,在加入層析柱之前進(jìn)行脫氣。

          完成上樣后,用平衡緩沖液(2-3CV)和優(yōu)化的低電導(dǎo)率緩沖液沖洗層析柱,以改善雜質(zhì)去除。例如,可以應(yīng)用10mM Tris-HCl、0. 2 M NaCl、1mM EDTA(pH 7.4)溶液 3-5CV,以促進(jìn)在樣品洗脫前去除雜質(zhì)。

          3.4洗脫

          在電導(dǎo)率降低時(shí),polyA和polyT之間會(huì)發(fā)生靜電排斥,導(dǎo)致兩者分離。從Seplife? Oligo dT(20)層析填料洗脫mRNA時(shí)遵循此原理。降低緩沖液中的鹽濃度甚至使用水都會(huì)導(dǎo)致 mRNA 洗脫。例如,10mM Tris-HCl、1mM EDTA(pH 7.4)3-5CV溶液或使用3-5CV水進(jìn)行樣品洗脫。應(yīng)優(yōu)化洗脫條件,以確保應(yīng)用最佳條件以實(shí)現(xiàn)高純度和 mRNA 回收率。

          可以通過加熱洗脫緩沖液或?qū)⑾疵撝訜嶂?5 o C來增強(qiáng)洗脫。

          3.5再生

          Seplife? Oligo dT(20)色譜填料應(yīng)根據(jù)污染嚴(yán)重程度用3-5CV水或20% - 30%乙醇溶液沖洗。再生過程后應(yīng)進(jìn)行 CIP 和用平衡緩沖液清洗柱或在儲(chǔ)存溶液中平衡。

          3.6在位清洗(CIP)

          Seplife? Oligo dT(20)色譜填料可用 3-5CV 的 0.1M NaOH 溶液消毒。如果需要更嚴(yán)格的 CIP,則可以使用0.5M NaOH溶液(3-5CV)。

          CIP 后,用平衡緩沖液沖洗柱3-5CV。

          4.儲(chǔ)存

          不立即使用的層析填料應(yīng)儲(chǔ)存在2-8 °C的20%乙醇中。已裝填的填料應(yīng)儲(chǔ)存在 2-8 °C 的 20% 乙醇中。請(qǐng)勿冷凍。

          使用前,讓散裝介質(zhì)和填充柱達(dá)到室溫。

          5. 運(yùn)輸

          運(yùn)輸過程中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品一起運(yùn)輸。

          6. 注意事項(xiàng)

          6.1層析柱選擇:理論上只要柱子足夠長,就能得到理想的分離度,但由于柱子的流速與壓力梯度有關(guān),柱長的增加會(huì)使流速變慢,峰形變寬,分離度降低;而隨著柱徑的增加,液流的不均勻性增大,分離度明顯下降。

          6.2柱裝填:裝填后的柱床表面必須平整,無溝流、氣泡,否則應(yīng)重新裝填。

          6.3在純化過程中,必須嚴(yán)格控制洗脫緩沖液的pH值和電導(dǎo)率。在柱層析之前,必須用平衡緩沖液徹底平衡樣品和層析介質(zhì)。

          6.4洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,不宜過快。

          6.5在上樣和整個(gè)洗脫過程中,防止柱表面干燥。

          訂購信息

          產(chǎn)品牌號(hào)貨號(hào)包裝規(guī)格
          Seplife? Oligo dT(20)PS11225X(50)1-125ml
          PS11225X(50)1-2100ml
          PS11225X(50)1-3500ml
          PS11225X(50)1-41L
          PS11225X(50)1-55L
          PS11225X(50)1-610L

          生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽

          使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年

          注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

          注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園

          售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司

          郵政編碼:710076

          聯(lián)系電話:86-29-8110 4050

          傳真:029-8669 1600-8254

          官方網(wǎng)站:www.sunresin.com

          注冊(cè)人名稱/銷售企業(yè):蘇州藍(lán)曉生物科技有限公司

          注冊(cè)人地址/銷售地址:蘇州市區(qū)工業(yè)園區(qū)裕新路108號(hào)5樓525室

          聯(lián)系電話:0512-65160522


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