Boricacid Seplife 4FF層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型親和層析介質(zhì),是將硼酸類化合物偶聯(lián)到4%高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上。Boricacid Seplife 4FF具有物理和化學(xué)性能穩(wěn)定,特異性結(jié)合強(qiáng),流速快,基團(tuán)脫落少,使用壽命長(zhǎng)的特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于糖類、核苷酸、核酸、肽及酶類的分離純化,特別適合糖蛋白的分離純化。
產(chǎn)品牌號(hào) | Boricacid Seplife 4FF |
外觀 | 球狀凝膠,無臭無味 |
基質(zhì) | Seplife 4FF |
配基 | 硼酸鹽 |
最高流速(cm/h) | 420 |
粒徑(μm) | 45~165 |
結(jié)合載量(mg/ml) | 10mg Con A /ml |
配基密度(umol/ml) | 20 |
pH穩(wěn)定性 | 3~10(長(zhǎng)期);2~13(短期,在位清洗[CIP]) |
應(yīng)用 | 糖蛋白的分離純化 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
用2~5個(gè)柱床體積的初始緩沖溶液進(jìn)行平衡,直至pH和電導(dǎo)率保持不變。
3.3上樣
樣品的預(yù)處理:樣品需先用0.45μm濾膜過濾,然后上樣,以免堵塞層析柱。上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,也可通過線性實(shí)驗(yàn)找到最佳上樣量。
3.4洗脫
可以用pH4-6的緩沖液洗脫,也可以用1-100mM糖類競(jìng)爭(zhēng)線性或階段洗脫,例如用山梨醇、甘露醇等,其中Tris最有效。
3.5 再生
先用0.1mol/L Tris-HCl pH5.0緩沖液洗3個(gè)柱床體積,然后用0.5mol/L NaOH(含2mol/L NaCl)洗3個(gè)柱床體積,最后用20%乙醇溶液洗3個(gè)柱床體積。經(jīng)常用酸堿洗填料會(huì)使填料的吸附能力下降,所以清洗要盡量縮短時(shí)間。
3.6在位清洗
(1)去除因離子交換作用吸附的蛋白:用2mol/L NaCl溶液反向清洗2~3個(gè)柱床體積。
(2)去除強(qiáng)疏水性蛋白和脂質(zhì)等:用70%乙醇或者30%異丙醇反向清洗4個(gè)柱床體積。
3.7存儲(chǔ)
密封保存在4~8℃,保存溶液為20%乙醇,干燥、通風(fēng)、清潔處,不可冷凍;用過的柱子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
注意事項(xiàng)
(1)該介質(zhì)從冷室或冰箱中取出后最好在室溫下恢復(fù)到室溫,然后緩慢搖勻后裝柱,以免產(chǎn)生氣泡影響柱效。
(2)吸附:pH8.5-10,為避免離子交換的干擾,鹽濃度控制在10mmol/L-500mmol/L,緩沖液或者樣品中不能有Tris及三乙醇胺類物質(zhì),一些二價(jià)陽(yáng)離子可以增加目標(biāo)物質(zhì)的吸附力,一些非離子表面活性劑也可以增加目標(biāo)物質(zhì)和填料的作用力。
(3)上樣樣品必須與平衡緩沖液的pH、電導(dǎo)相同。
(4)洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過快。
(5)加樣及整個(gè)洗脫過程中,嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
Boricacid Seplife 4FF | A4063102 | 25ml |
A4063103 | 100ml | |
A4063104 | 500ml | |
A4063105 | 1L | |
A4063106 | 5L | |
A4063107 | 10L |
生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
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