Seplife G50 M層析介質(zhì)是一種具有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子化合物,它是由葡聚糖加入交聯(lián)劑環(huán)氧氯丙烷通過醚鍵互相交聯(lián)聚合而成,交聯(lián)度越大,網(wǎng)孔結(jié)構(gòu)就越緊密,吸水后的體積膨脹就越小,能允許進(jìn)入層析介質(zhì)內(nèi)部的分子的分子量也就越小,反之亦然。層析時,大于層析介質(zhì)孔徑的大分子,被阻于凝膠相外,沿著層析介質(zhì)顆粒之間的間隙走,下移速度最快,故最先洗脫下來,中等大小的分子進(jìn)入部分層析介質(zhì)孔中,洗脫速度次之,而小分子因為能夠進(jìn)入全部層析介質(zhì)孔中,受到阻力最大,故最后被洗脫下來,由此,物質(zhì)得到分離和純化。Seplife G50葡聚糖層析介質(zhì)適用于脫鹽、多肽分離、清洗生物提取液、分子量測定。
產(chǎn)品牌號 | Seplife G50 M |
外觀 | 白色球狀,無臭無味 |
粒徑(干,μm) | 50~150 |
溶脹度 | 9~11 |
分離范圍 | 1500~3×104 |
耐壓 | 遵從Darcy 定律 |
流速 | 遵從Darcy 定律 |
pH穩(wěn)定性 | 2~10(長期),2~13(短期,在位清洗[CIP]) |
應(yīng)用 | 適用于脫鹽、多肽分離、清洗生物提取液、分子量測定 |
使用方法
3.1預(yù)處理
稱取所需Seplife G50 M,置于50~100倍蒸餾水中溶脹,室溫條件下一般需要溶脹1~2天,沸水中一般需要2小時,讓凝膠充分溶脹直至體積不再變化。
注:在溶脹前加入蒸餾水使其自然沉降,自然沉降后若上層溶液中漂浮的凝膠碎片顆粒多,需要重復(fù)多次漂洗將其除去,防止層析時阻塞凝膠柱,影響流速。
3.2 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.3平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。
3.4上樣
(1)介質(zhì)對樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來。
(2)凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50 cm 以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5:1即可。
(3)樣品中如有雜質(zhì)或沉淀應(yīng)該在上樣前過濾或離心除去,樣品的粘度不能過高,否則影響分離效果。
3.5洗脫
可以采用無鹽水,也可以采用用平衡緩沖液做洗脫劑進(jìn)行洗脫。在平衡緩沖液中加入NaCl等梯度洗脫或者鹽梯度洗脫都可以完全分離。
3.6在位清洗
凝膠使用10次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗4個柱床體積,再以至少3個柱床體積平衡緩沖液再生。
3.7存儲
干粉保存在4~30℃,干燥、通風(fēng)、清潔處;溶脹后的介質(zhì)保存在4~8℃,20%乙醇溶液中,避免與氧化劑接觸,不可冷凍。
3.8運輸
運輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運。
4.注意事項
(1)樣品必須澄清沒有顆粒。
(2)樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(4)洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過快。
(5)加樣及整個洗脫過程中,嚴(yán)防柱面變干。
(6)本品應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長時間暴露在空氣中。
產(chǎn)品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
Seplife G50 M | D1007310M | 25g |
D1007311M | 100g | |
D1007312M | 500g | |
D1007313M | 1kg | |
D1007314M | 5kg | |
D1007315M | 10kg |
生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍(lán)曉科技園
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