Butyl Large Scale 層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型疏水層析介質(zhì),是將丁基偶聯(lián)到高流速瓊脂糖凝膠過濾層析介質(zhì)上形成的疏水性層析介質(zhì),它利用生物分子表面的疏水基團(tuán)與層析介質(zhì)上的疏水基團(tuán)相互作用強(qiáng)弱不同進(jìn)行分離,具有載量高、流速快,反壓低等特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于生物大分子的純化分離,可以顯著提高生產(chǎn)效率,節(jié)約成本。
產(chǎn)品牌號 | Butyl Large Scale |
外觀 | 白色球狀凝膠,無臭無味 |
種類 | 疏水填料 |
基質(zhì) | Large Scale 微球 |
配基 | 丁基 |
粒徑d50v(μm) | ~75 |
pH穩(wěn)定性 | 3~13(長期),2~14(短期,在位清洗[CIP]) |
動態(tài)載量QB10(mg /ml) | >27(HSA) |
配基密度(umol /ml) | >53 |
工作溫度 | 4~30℃ |
耐壓流速 | Deltacp 0.3MPa條件下, >600cm/h ,柱床高20cm |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 1mol/L 氫氧化鈉;70%乙醇;30%異丙醇; 0.5% SDS;10%乙二醇;6mol/L鹽酸胍;8mol/L尿素;3mol/L(NH4)2SO4 |
應(yīng)用 | 用于生物制藥和生物工程下游生物大分子的分離純化 |
使用方法
3.1 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.2平衡
使用2~5倍柱床體積的平衡緩沖溶液平衡柱子,直至流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液,如0.02~0.05mol/L的PBS中加1~2.5mol/L(NH4)2SO4等。
3.3上樣
(1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾以后上樣。
(2)一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)物。
(3)介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質(zhì)、流動相的離子強(qiáng)度和溫度。鹽濃度大、溫度高或樣品組分疏水性強(qiáng),介質(zhì)對組分吸附牢。
3.4洗脫
采用降低鹽濃度使吸附的生物分子被洗脫下來。添加表面活性劑或者有機(jī)溶劑可加強(qiáng)洗脫,最常用的是低鹽濃度緩沖液,如0.02~0.05 mol/L的PBS。
3.5 再生
(1)先用蒸餾水按操作流速沖洗3~5個柱床體積,然后用平衡液清洗3~5個柱床體積。
(2)再生時若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)洗不掉,可用在位清洗法除去。
3.6在位清洗
(1)對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可用0.5~1倍柱床體積的2M NaCl去除。
(2)對于沉淀蛋白、疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可以先用1倍柱床體積的0.1M NaOH沖洗,再用平衡緩沖溶液清洗直至pH呈中性。
(3)對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱床體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,需注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
3.7存儲
密封保存在4~30℃(保存溶液為20%乙醇)干燥、通風(fēng)、清潔處,不可冷凍;用過的柱子保存在4~8℃,20%乙醇溶液中。
3.8運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
4.注意事項(xiàng)
(1)典型的配基和蛋白質(zhì)結(jié)合強(qiáng)度由強(qiáng)到弱的順序是:苯基(phenyl)、辛基(octyl)、丁基(butyl)、異丙基(isopropyl)、醚(ether)。如果樣品和介質(zhì)結(jié)合緊密,可更換為弱介質(zhì)更容易洗脫下來。
(2)在疏水層析中,疏水介質(zhì)和疏水配基對選擇性影響非常大,以下因素的影響也不可忽視:樣品溶解度、純化規(guī)模、所需規(guī)模的正確配基。
(3)由于強(qiáng)疏水蛋白質(zhì)和疏水配基結(jié)合非常緊密,因此在篩選疏水介質(zhì)時,如果樣品是強(qiáng)疏水蛋白質(zhì),可從低疏水性介質(zhì)開始,選擇在低鹽濃度下得到最高分辨率和載量的介質(zhì)。
(4)樣品與層析介質(zhì)必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(5)所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(6)若是大規(guī)模純化和捕獲蛋白,采用非連續(xù)(間隔式)濃度變化洗脫,可以減少分離時間和緩沖液用量。
(7)加樣及整個洗脫過程中,嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號 | 貨號 | 包裝規(guī)格 |
Butyl Seplife Large Scale | A3063302 | 25ml |
A3063303 | 100ml | |
A3063304 | 500ml | |
A3063305 | 1L | |
A3063306 | 5L | |
A3063307 | 10L |
生產(chǎn)日期:見標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號藍(lán)曉科技園
售后服務(wù)單位:西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
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