DEAE Seplife A25層析介質(zhì)是藍(lán)曉科技自主研發(fā)的一種新型高度交聯(lián)的葡聚糖層析介質(zhì),具有高流速、低反壓、高動(dòng)態(tài)載量及良好的化學(xué)穩(wěn)定性。DEAE Seplife? A-25層析介質(zhì)方便進(jìn)行規(guī)模放大,可以縮短生產(chǎn)時(shí)間,提高生產(chǎn)效率,降低大規(guī)模生產(chǎn)成本。
產(chǎn)品牌號(hào) | DEAE Seplife A25 |
外觀 | 白色顆粒,無(wú)臭無(wú)味 |
種類 | 弱陰離子交換填料 |
基質(zhì) | 葡聚糖G25 |
配基 | 二乙胺基乙基 |
粒徑(干,μm) | 40~120 |
吸附量(mg /ml) | 140 (α-乳白蛋白) |
離子交換量(mmol /g干膠) | 3.0~4.0 |
pH工作范圍 | 2~9 |
pH穩(wěn)定性 | 2~13(長(zhǎng)期),2~13(短期) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 以下溶液中穩(wěn)定:常用的水相緩沖溶液;如8M尿素、6 M鹽酸胍 |
耐熱性 | 121℃,0.1M NaCl溶液30min |
應(yīng)用 | 低分子量蛋白、多肽、核苷酸以及巨大分子,分離范圍:(MW>30000) |
使用方法
DEAE seplife? A-25是粉末狀,使用時(shí)需要溶脹,其溶脹比取決于所使用的緩沖溶液,不同溶液中的溶脹比不同,而且存在較大差異。溶脹時(shí)不能使用磁力攪拌,否則易導(dǎo)致凝膠破碎。
3.1預(yù)處理
稱取所需量的DEAE seplife? A-25(以下簡(jiǎn)稱A-25),置于50~100倍蒸餾水或者上樣平衡液中,溶脹,室溫條件下一般需要溶脹1~2天,沸水中一般需要2小時(shí)。
3.2 裝柱
裝柱按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作。必須保證每種材料都處于工作溫度,凝膠裝柱前需要脫氣。
3.3平衡
使用2~5倍柱床體積的上樣平衡液平衡柱子,務(wù)必使流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。
3.4上樣
根據(jù)目標(biāo)產(chǎn)物濃度和凝膠的載量確定上樣量。
3.5清洗
上樣完畢后,再使用上樣緩沖液平衡柱子,清洗掉不結(jié)合的蛋白和雜質(zhì),直至流出液的電導(dǎo)和pH同上樣緩沖液的電導(dǎo)和pH完全一致。
3.6洗脫
可以使用增大緩沖液中鹽離子濃度或者降低pH的連續(xù)洗脫或者梯度洗脫。
3.7 再生
先以1~2M NaCl洗去柱上的雜蛋白,再以蒸餾水洗去柱中鹽,使流出液的電導(dǎo)和pH穩(wěn)定。然后用上樣緩沖液過(guò)柱,直至流出液的電導(dǎo)和pH穩(wěn)定。
3.8存儲(chǔ)
A-25干粉保存于4~30℃、干燥、通風(fēng)、清潔處;溶脹后的凝膠保存于4~8℃,20%乙醇或者0.1M NaOH溶液中。
3.9運(yùn)輸
運(yùn)輸中避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
4.注意事項(xiàng)
(1)柱的選擇:從理論上說(shuō),只要柱足夠長(zhǎng),就可以獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān),柱長(zhǎng)增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低;柱的直徑增加,使液體流動(dòng)的不均勻性增加,分辨率明顯下降。
(2)純化過(guò)程必須嚴(yán)格控制洗脫緩沖液的pH及離子強(qiáng)度。樣品與DEAE seplife? A-25必須用洗脫緩沖液徹底平衡后,才能進(jìn)行柱層析。
(3)所裝的柱床必須表面平整,無(wú)溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。
(4)洗脫過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過(guò)快。
(5)上樣的體積要小,濃度不宜過(guò)高。
(6)加樣及整個(gè)洗脫過(guò)程中,嚴(yán)防柱面變干。
產(chǎn)品牌號(hào) | 貨號(hào) | 包裝規(guī)格 |
DEAE Seplife A25 | D2017210 | 25g |
D2017211 | 100g | |
D2017212 | 500g | |
D2017213 | 1kg | |
D2017214 | 5kg | |
D2017215 | 10kg |
生產(chǎn)日期:見(jiàn)標(biāo)簽
使用期限:在適當(dāng)?shù)馁A藏條件下可貯藏5年
注冊(cè)人名稱/生產(chǎn)企業(yè):西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司
注冊(cè)人住址/生產(chǎn)地址:西安市高新開(kāi)發(fā)區(qū)錦業(yè)路135號(hào)藍(lán)曉科技園
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