01、基因治療
90年代早期，由French Anderson等領(lǐng)導(dǎo)的一項(xiàng)試驗(yàn)也采用了一種離體治療方法，對(duì)腺苷脫氨酶缺乏癥嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷病(ADA-SCID)患者，注射由攜帶ADA基因的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)化的T細(xì)胞進(jìn)行治療，這被認(rèn)為是人類(lèi)第一次成功的基因治療?；蛑委煟╣ene therapy）是指將外源正?；?qū)氚屑?xì)胞，以糾正或補(bǔ)償缺陷和異?；蛞鸬募膊?，以達(dá)到治療目的。
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腺病毒載體自1993年首次被應(yīng)用于臨床試驗(yàn)以來(lái)，迄今為止大約有40％基因治療臨床試驗(yàn)方案采用腺病毒為載體，僅次于RV載體_3?J。至今AV載體已經(jīng)發(fā)展了4代，第2、3代腺病毒去除EI、E2和E4編碼序列，與第一代相比，有更低的免疫原性和更大的載體容量。第四代腺病毒僅含有反向末端重復(fù)序列(1TRs)和包裝信號(hào)，載體容量達(dá)37kb，進(jìn)一步降低了免疫原性，被稱(chēng)為“高容量”載體。AV載體具有宿主范圍廣、基因轉(zhuǎn)移效率高、對(duì)非分裂細(xì)胞也有感染性、比較容易制備和操作、理化性質(zhì)穩(wěn)定、遺傳毒性較低及比較安全等優(yōu)點(diǎn)。
腺病毒載體下游工藝過(guò)程，澄清的病毒溶液，先用陰離子交換層析Q Large Scale捕獲，在用多模式層析介質(zhì)Seplife Suncore 700流穿模式精細(xì)純化，或者用超濾洗濾的方式濃縮，濃縮后用凝膠過(guò)濾層析介質(zhì)Seplife 4FF純化。
腺病毒載體純化用介質(zhì)推薦：
Q Large Scale
Seplife Suncore 700
Seplife 4FF
Q Large Scale HP
Seplife LX-Q400 (400nm孔徑）
03、慢病毒載體
慢病毒屬逆轉(zhuǎn)錄病毒科，為二倍體RNA病毒，分為靈長(zhǎng)類(lèi)病毒如人類(lèi)免疫缺陷病毒一1(HIV-1)、猴免疫缺陷病毒(SIV)和非靈長(zhǎng)類(lèi)病毒如馬傳染性貧血病毒(EIAV)，但它與逆轉(zhuǎn)錄病毒不同，能感染非分裂細(xì)胞。
慢病毒載體下游純化工藝過(guò)程和腺病毒類(lèi)似。
慢病毒載體純化用介質(zhì)推薦：
Q Large Scale
Seplife Suncore 700
Seplife 4FF
Q Large Scale HP
Seplife LX-Q400 (400nm孔徑）
腺病毒相關(guān)病毒(AAV)是一種缺陷型的單鏈DNA病毒，只有在輔助病毒如腺病毒、單純皰疹病毒、痘苗病毒等存在的情況下，才能進(jìn)行最佳復(fù)制，產(chǎn)生新的病毒顆粒，否則只能進(jìn)行潛伏感染。從v載體既可以轉(zhuǎn)染分裂細(xì)胞又可以轉(zhuǎn)染非分裂細(xì)胞，在宿主體內(nèi)以定向整合的方式存在，70％?以上的整合位點(diǎn)位于第19號(hào)染色體q13．3-qter區(qū)，且對(duì)人體無(wú)致病性，故AAv重組體在細(xì)胞內(nèi)能長(zhǎng)期穩(wěn)定地表達(dá)，還可避免隨機(jī)整合可能引起的抑癌基因失活和原癌基因激活的危險(xiǎn)，且在體內(nèi)不引起明顯的病理變化，表明AAV是一種很有前途的基因治療載體_9j。AAv載體在多種組織已進(jìn)行了成功的轉(zhuǎn)染，如肝、腦、心肌、骨骼肌、視網(wǎng)膜和呼吸道上皮等組織，未發(fā)現(xiàn)對(duì)機(jī)體有致病性。
腺相關(guān)病毒相比慢病毒和腺病毒分子尺寸較小，在純化填料選擇上和腺病毒稍有區(qū)別。
腺相關(guān)病毒載體純化用介質(zhì)推薦：
Q Large Scale
Seplife LXMS-15Q/30Q （去空殼病毒）
Seplife Suncore 400
Seplife 6FF
Q Large Scale HP
Seplife LX-Q400 (400nm孔徑）
Heparin Seplife FF（AAV2.AAV8親和層析）
單純皰疹病毒是一種雙鏈DNA病毒，作為基因治療載體具有以下優(yōu)點(diǎn)：①容納外源基因的長(zhǎng)度達(dá)4o～50I，是目前容量最大的病毒載體。②?具嗜神經(jīng)性，可在神經(jīng)元中建立終生潛伏性感染，非常適用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病如帕金森病、Azheimer病等。③滴度高。④可感染分裂期和非分裂期細(xì)胞。
單純皰疹病毒載體純化用介質(zhì)推薦：
Q Large Scale
Seplife Suncore 700
Seplife 4FF
Q Large Scale HP
Seplife LX-Q400 (400nm孔徑）
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