疏水層析
是根據(jù)不同的蛋白與疏水表面產(chǎn)生的相互作用的差異，進(jìn)行蛋白分離的一種方法。一般而言，離子強(qiáng)度（鹽濃度）越高，物質(zhì)所形成的疏水鍵越強(qiáng)。
常用的疏水填料有兩種類型：Butyl, Phenyl分別為在seplife 6FF基球上通過一個短接頭，共價鍵合丁基，苯基的層析填料。結(jié)構(gòu)見下圖：
疏水介質(zhì)特點(diǎn)
◆高鹽濃度的樣品不必做預(yù)處理就可以直接上樣
◆溶解在7M鹽酸胍中的蛋白質(zhì)包涵體可以直接上樣，一次層析分離就可以實(shí)現(xiàn)除去鹽酸胍、蛋白復(fù)性和分離三個目的，而且復(fù)
◆性效果常常好于其他方法
疏水層析基本操作
1、層析柱的選擇
柱床高度通常為5-15cm，規(guī)模放大時，可保持柱高不變，增加柱子的直徑。
2、緩沖條件的選擇
3、緩沖液的選擇
◆隨著pH的升高，疏水作用相應(yīng)下降
◆由于pH升高時，被中和的帶點(diǎn)基團(tuán)增加，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)的親水性增加
◆在中性pH條件下與疏水相互作用介質(zhì)不結(jié)合的蛋白質(zhì)，在酸性pH條件下則能夠結(jié)合
4、蛋白質(zhì)的洗脫
◆低濃度的水溶性乙醇、去污劑和具有鹽溶作用的鹽破壞水的結(jié)構(gòu)、降低表面張力，從而削弱疏水相互作用。
◆乙醇或去污劑的非極性區(qū)與結(jié)合的蛋白質(zhì)競爭疏水性配基，從而將蛋白質(zhì)替代下來
5、柱子的再生、清潔和儲存
◆輕度污染時，蒸餾水洗滌
◆污染物緊密結(jié)合時，6 mol/L尿素或6 mol/L鹽酸胍洗滌＋起始緩沖液或貯存緩沖液洗滌
◆NaOH可用于溶解變性和沉淀的蛋白質(zhì)及脂類
◆未使用的介質(zhì)儲存在封閉的容器中，在4-25℃的條件下保存
◆用過的介質(zhì)應(yīng)貯存在含有適當(dāng)抑菌劑的溶液中，在4 ～ 8℃的條件下保存，不得冷凍
產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)
壓力曲線
色譜柱：XK16*20
流動相：0.1mol/L Nacl
產(chǎn)品訂購信息
蘇州市工業(yè)園區(qū)裕新路108號
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