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常見問題
2022-05-19 09:28:30
藍曉離子交換介質(zhì)那么多，該如何選擇
種類多是為了更精細更精準匹配不同的項目，基質(zhì)是 Seplife BB系列的離子交換介質(zhì)粒徑是100-300um，裝柱在高流速下依然有較低的背壓，適合粘度比較大樣...
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2022-05-19 09:26:44
蛋白質(zhì)純化過程中失活
a.蛋白去折疊或聚集:優(yōu)化緩沖液使其利于蛋白質(zhì)保持穩(wěn)定。蛋白質(zhì)在介質(zhì)上的高密度下容易聚集可以添加一些蛋白的增溶劑等。b.純化過程中保持蛋白的活性的輔助因子被去除...
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2022-05-19 09:24:15
蛋白結(jié)合在柱床上未洗脫出
a.蛋白和介質(zhì)結(jié)合力過強:增加洗脫強度，比如his蛋白和鎳柱結(jié)合，可以增加取代基咪唑的濃度。b.蛋白聚集在層析柱上:通過調(diào)整層析過程的緩沖液增加蛋白的穩(wěn)定性，改...
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2022-05-19 09:20:18
his標簽蛋白和鎳柱不結(jié)合
a.標簽未翻譯或標簽被包裹在結(jié)構(gòu)內(nèi)部:檢查質(zhì)粒序列或?qū)撕炓频狡渌恢?，標簽移到其它位置扔被包裹在結(jié)構(gòu)內(nèi)部時，就要將標簽暴露出來b.結(jié)合緩沖液不合適及層析柱沒平...
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2022-01-05 18:27:34
重組蛋白標簽的意義及常用標簽
蛋白質(zhì)作為生命活動的主要執(zhí)行者，絕大多數(shù)疾病的發(fā)生都與其結(jié)構(gòu)、功能密切相關(guān)。因此，想要對某一特定的蛋白進行分析與研究則成為一項頗為棘手的問題。此時，蛋白標簽（P...
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2021-12-31 19:12:14
多模式層析——pH和鹽雙梯度洗脫賦能抗體高效純化
多模式層析：pH和鹽雙梯度洗脫賦能抗體高效純化樣品：rProtein A Seplife Suno洗脫液(pH7.83， cond:11.84mS/cm，con...
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2021-12-31 18:52:18
生物工藝中常用添加劑解析
表一：蛋白質(zhì)純化中用于增強蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的常用添加劑。TritonX -114溫度在22℃以上時，在蛋白質(zhì)溶液中加入2%的TritonX -114可使蛋白質(zhì)從去垢...
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2021-12-23 13:28:40
抗體純化中Protein A親和層析階段HCP去除策略
宿主細胞蛋白（host cell proteins,HCPs)是基因工程菌株細胞株產(chǎn)生的與基因工程目的產(chǎn)物——抗體蛋白及Fc融合蛋白無關(guān)的蛋白混合物，HCP的組...
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2021-12-23 13:12:49
全面解析His標簽蛋白純化及金屬螯合層析
His-Tag融合蛋白簡介His-Tag融合蛋白是目前最常見的蛋白表達方式，而且很成熟，它的優(yōu)點是表達方便且不影響蛋白的活性，無論是可溶性表達或者包涵體都可以用...
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2021-12-23 13:05:18
His標簽蛋白用鎳柱純化有雜帶怎么辦
問:His標簽蛋白鎳柱純化有雜帶怎么辦？1.樣品本身的的屬性，His蛋白容易被體系中的蛋白酶降解時，此時就要在樣品中加入蛋白酶抑制劑。避免在純化過程中His蛋白...
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